原理
荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。
材料与仪器
褐球固氮菌/胶质芽孢杆菌(约 2d 无氮培养基琼脂斜面培养物)
绘图墨水 1% 甲基紫水溶液 1% 结晶紫水溶液 6% 葡萄糖水溶液 20% 硫酸铜水溶液 甲醇
载玻片 盖玻片 滤纸 显微镜
绘图墨水 1% 甲基紫水溶液 1% 结晶紫水溶液 6% 葡萄糖水溶液 20% 硫酸铜水溶液 甲醇
载玻片 盖玻片 滤纸 显微镜
步骤
1. 涂片
按常规取菌涂片。
2. 固定
空气中自然干燥令不可加热干燥固定。
3. 染色
用 1% 的结晶紫水溶液染色 2 min。
4. 脱色
以 20% 的硫酸铜水溶液冲洗,用吸水纸吸干残液。
5. 镜检
干后用油镜观察。
菌体染成深紫色,菌体周围的荚膜呈淡紫色。
来源:丁香实验