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荚膜染色实验

实验分类:

微生物实验

最新修订时间:

简介

本实验介绍 3 种荚膜染色法:湿墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。


来源:《微生物学实验(第三版)》


来源:丁香实验

操作方法

湿墨水法

1. 制备菌和墨水混合液加一滴墨水于洁净的载玻片上,然后挑取少量菌体与其混合均匀。2. 加盖玻片将一洁净盖玻片盖在混合液上,然后在盖玻片上放一张滤纸,轻轻桉压以吸去多余的混合液。3. 镜检用低倍镜和高倍镜观察,若用相差显微镜观察效果更好。背景灰色,菌体较暗,在藏体周围呈现明亮的透明圈即为荚膜。

干墨水法

1. 制混合液加一滴 6% 葡萄糖液于洁净载玻片的一端,然后挑取少量菌体与其混合,再加一环墨水,充分混匀。2. 涂片另取一端边缘光滑的载玻片作推片,将推片一端的边缘置于混合液前方,然后稍向后拉,当推片与混合液接触后,轻轻左右移动,使之沿推片接触的后缘散开,尔后以大约 30° 角迅速将混合液推向玻片另一端,使混合液铺成薄层(图 IV-4)。3. 干燥空气中自然干燥。4. 固定用甲醇浸没涂片固定一分钟

Anthony 氏法

1. 涂片按常规取菌涂片。2. 固定空气中自然干燥令不可加热干燥固定。3. 染色用 1% 的结晶紫水溶液染色 2 min。4. 脱色以 20% 的硫酸铜水溶液冲洗,用吸水纸吸干残液。5. 镜检干后用油镜观察。菌体染成深紫色,菌体周围的荚膜呈淡紫色。

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