离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响实验（Straub氏法）
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【原理】
作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性和收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。血钾浓度过高时(高于7.9mmol/L)，心肌兴奋性、自律性、传导性、收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。血钙浓度升高时，心肌收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。肾上腺素可使心率加快、传导加快和心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
【预习要求】
1．仪器设备知识 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统P（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。
2．实验理论 实验动物知识参见第二章第一节 生理科学实验常用实验动物的种类和第四章第一节 动物实验的基本操作；统计学知识参见第五章第四节 常用统计指标和方法；实验理论知识参见生理学教材中有关心脏的生物电及心肌的生理特性、自主神经系统对心血管活动的调节内容。检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。
3．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。
4．预测结果 预测无钙灌流液、高钙灌流液、高钾灌流液、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响。
【材料】
蟾蜍或蛙；微机生物信号处理系统，张力换能器；任氏液，无钙任氏液，30g/LCaCl2，10g/LKCl，0.1g/L肾上腺素溶液，10-2g/L乙酰胆碱溶液，10g/L普萘洛尔。
【方法】
1．仪器连接和参数设置
按图8-22-1连接，张力换能器输出线接微机生物信号处理系统第1通道（亦可选择其它通道）， 微机生物信号处理系统参数设置：
（1）RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“生理科学实验中”的“蛙心灌流”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率400Hz，扫描速度 1s/div。
（2）PcLab和MedLab系统：点击“实验”菜单，选择“常用生理学实验”或“文件”菜单“打开配置”中的“蛙心收缩”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：通道放大倍数200~500、直流耦合（下限频率DC）、上限频率10Hz，采样间隔5ms Hz。
2．离体蛙心制备
（1）取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓后，仰卧固定在蛙板上，从剑突下将胸部皮肤向上剪开，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏，分离左、右主动脉。
（2）在左主动脉下方穿1根线，靠头端结扎作插管时牵引用，在主动脉干下方穿1根线，在动脉圆锥上方系一松结用于结扎固定蛙心插管。
（3）左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口，右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此切口处插入动脉圆锥。当插管头到达动脉圆锥时，用镊子夹住动脉圆锥少许，将插管稍稍后退，并转向心室中央方向，镊子向插管的平行方向提拉，心室收缩期时将插管插入心室（图8-22-2）。蛙心插管进入心室后管内的任氏液的液面会随心室的舒缩而上下波动。蛙心插管进入心室后，用预先准备好的松结扎紧，扎线套在蛙心插管的侧钩上打结并固定。剪断主动脉左右分支。
图8-22-2 蛙心插管示意图 （4）轻轻提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结扎线应尽量下压，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有组织，将蛙心游离出来。
作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性和收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。血钾浓度过高时(高于7.9mmol/L)，心肌兴奋性、自律性、传导性、收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。血钙浓度升高时，心肌收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。肾上腺素可使心率加快、传导加快和心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
【预习要求】
1．仪器设备知识 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统P（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。
2．实验理论 实验动物知识参见第二章第一节 生理科学实验常用实验动物的种类和第四章第一节 动物实验的基本操作；统计学知识参见第五章第四节 常用统计指标和方法；实验理论知识参见生理学教材中有关心脏的生物电及心肌的生理特性、自主神经系统对心血管活动的调节内容。检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。
3．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。
4．预测结果 预测无钙灌流液、高钙灌流液、高钾灌流液、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响。
【材料】
蟾蜍或蛙；微机生物信号处理系统，张力换能器；任氏液，无钙任氏液，30g/LCaCl2，10g/LKCl，0.1g/L肾上腺素溶液，10-2g/L乙酰胆碱溶液，10g/L普萘洛尔。
【方法】
1．仪器连接和参数设置
按图8-22-1连接，张力换能器输出线接微机生物信号处理系统第1通道（亦可选择其它通道）， 微机生物信号处理系统参数设置：
（1）RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“生理科学实验中”的“蛙心灌流”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率400Hz，扫描速度 1s/div。
（2）PcLab和MedLab系统：点击“实验”菜单，选择“常用生理学实验”或“文件”菜单“打开配置”中的“蛙心收缩”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：通道放大倍数200~500、直流耦合（下限频率DC）、上限频率10Hz，采样间隔5ms Hz。
2．离体蛙心制备
（1）取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓后，仰卧固定在蛙板上，从剑突下将胸部皮肤向上剪开，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏，分离左、右主动脉。
（2）在左主动脉下方穿1根线，靠头端结扎作插管时牵引用，在主动脉干下方穿1根线，在动脉圆锥上方系一松结用于结扎固定蛙心插管。
（3）左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口，右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此切口处插入动脉圆锥。当插管头到达动脉圆锥时，用镊子夹住动脉圆锥少许，将插管稍稍后退，并转向心室中央方向，镊子向插管的平行方向提拉，心室收缩期时将插管插入心室（图8-22-2）。蛙心插管进入心室后管内的任氏液的液面会随心室的舒缩而上下波动。蛙心插管进入心室后，用预先准备好的松结扎紧，扎线套在蛙心插管的侧钩上打结并固定。剪断主动脉左右分支。
图8-22-2 蛙心插管示意图 （4）轻轻提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结扎线应尽量下压，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有组织，将蛙心游离出来。
