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离体跌卵

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离体跌卵

【目的】

了解绒毛膜促性腺激素(HCG)刺激排卵的作用,以及进行体外跌卵的方法。

【原理】

HCG能直接作用于卵巢,促使已生长成熟的卵母细胞(卵黄积累已完成)进入生理成熟并排卵。

【器材】

雌蟾蜍或蛙:要求冬至(12月下旬)到自然产卵期前的雌性动物。

HCG,任氏液,玻璃广口瓶或指管瓶(容量30ml),S形玻璃钩,培养皿,解剖剪,眼科镊,计数器。

【步骤】

1、 取6只小瓶,2只瓶内加入30ml任氏液,不含HCG,作为对照组。2只瓶内加入含100I.U.HCG的任氏液30ml,另2只瓶内加入含400I.U.HCG的任氏液30ml,小瓶进行编号或注明。

2、 将一只雌蟾蜍的腹部剪开,取出卵巢,用任氏液洗涤数次。剪取6小块卵巢,每块卵巢约含100粒卵)。每只玻璃钩上悬挂一块卵巢小块,放入小瓶内,玻璃钩的另一端悬挂在瓶口上,使卵巢小块浸没在液面以下。

3、 将小瓶放入预先已调节好温度的 恒温箱 中,箱内温度19- <chmetcnv>20℃</chmetcnv> 。24小时后检查,是否有卵球跌至瓶底。排卵活动大约在受 激素 刺激10小时左右开始,15-18小时最旺盛,24小时结束。

4、 注意观察和记录开始跌卵的时间。24小时后,计算排卵百分率。将每只小瓶中的卵巢块取出,放在培养皿中准确计数,跌下的卵球也准确计数,然后求出排卵百分比。

 

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