lichenVY2F
为了做crispr,练习做卵的注射。参照文献,把昆虫卵放在卤代烃油700里头,往卵里注射1nL的水,不知道为啥老是漏出来,请问有大佬有类似的经验可能是什么原因导致的么?
sswei
可能注射时压力大、压力输出持续时间长等有关。
土井挞克树
我一般操作少量多次注射,不要一次注射太多。注射太多容易漏液
loveliufudan
卵注射时漏出来有多种可能性,以下是可能导致卵注射漏出来的一些原因:
针头选择不当:针头直径太大或者太小,都会影响注射的效果,太大的针头容易损伤卵细胞或者注入过多的液体,太小的针头则不容易将液体注入到卵内。
注射液浓度不合适:如果注射液太浓稠,会导致注射液在注射时黏稠度过高,不容易进入卵内,从而导致漏出来。
卵表面处理不当:在卵表面加入一定的粘附剂可以增加卵的黏性,从而提高注射液在卵内的粘附性。
技术操作不熟练:注射卵是一项技术操作,需要一定的经验和熟练程度。如果操作不当,也会导致注射液漏出来。
针对这些可能的原因,可以尝试以下措施:
更换适当直径的针头,通常建议使用20-30G的针头。
调整注射液的浓度,通常建议注射液的浓度为1-2μg/μL。
在卵表面加入粘附剂,比如polyvinylpyrrolidone (PVP)。
多进行练习,提高技术熟练程度。
最后,注射液漏出来不一定会影响后续的实验,可以根据具体情况进行判断。