实时荧光定量PCR可快速诊断结核病

　　荧光 定量PCR 检测TB-DNA具有以下特征：

1、高灵敏度，检测限度可达到10个菌/ml。根据临床资料显示，荧光定量PCR与浓缩集菌、培养法相比，对结核病检测的阳性率分别为：62.7%、37.9%、29.1%前者明显高于后者。

2、高特异型。对牛分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、草分枝杆菌、鸟分枝杆菌、肺炎球菌、百日咳、大肠杆菌等的检测结果均保持良好的阳性结果。

3、防污染。与蛋白电泳法等不同，该方法无须PCR的后处理，完全闭管扩增和检测，同时采用了dUTPUNG系统，有效地防范了PCR扩增物的污染，避免假阳性结果，为临床提供可靠的诊断依据。

4、操作简便、耗时短。该法在特定的荧光PCR检测仪上进行扩增和检测，不需要进行电泳或杂交的操作，只需要2-3小时即可完成PCR过程，有利于提高报告出具的速度，无须人工判断，自动收集和分析数据，观察结果可靠。

实时荧光定量PCR检测，主要是在一定的反应体系中，通过首先查找到样本中结核杆菌的基因，并进而对基因上某高保守的特定区段进行体外快速高保真的复制增殖，使其迅速被放大到巨大的信号而能够被识别检测。具有高特异性、高灵敏度、快速简便等特点。结核杆菌易受物理、化学、药物以及免疫因素的影响而发生变异（细胞壁缺陷或称L型菌、耐药变异菌、持续菌或休眠菌等），用传统细菌学技术难以检出，造成漏诊和假阴性。PCR方法检测对象是结核杆菌基因保守区段不受细胞表型和耐药等因素的影响，可提高阳性的检出率，为临床上及时诊断和治疗提供依据。

肺外结核包括多系统、多脏器、多种类型的结核病变，通常标本中含菌量较少，特别是组织标本中结核杆菌不易被暴露，不易获得细菌学证据，从而增加了肺外结核的误诊和漏诊，造成治疗的延误，而实时荧光定量PCR是公认的高灵敏度方法，对诊断和鉴别诊断肺外结核有较高的临床价值，可作为早期肺外结核的诊断方法。血型播散性肺结核通常临床表现、影象学的改变不典型，早期患者不咳或仅有干咳或仅有发热等中毒症状，极易误诊为其他呼吸道疾病。而用PCR检测血标本中的结核杆菌可大大提高阳性诊断率。所以疑似结核病者都可以做实时荧光定量TB一PCR检测，以便早期诊断。