放射免疫分析中造成测量误差的可能因素
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造成误差的可能来源有以下几个方面:
一、各种仪器:设备的准确性、稳定性、效率以及被污染等情况带来的误差。如:
(1)由于放射性测量仪器的稳定性、效率、样品试管的材料和均匀性及被测物的放射性强度等原因。
(2)由于样品的自吸收,本底校正,测定时间,可能的污染等原因。
(3)在试验室中所有的移液管、微量取样器以及天平的刻度、校准和使用方法等原因。
(4)由于反应试管、移液管以及测定用试管等表面清洁度和所引起的不同吸附等原因都可以对测定结果带来误差。
二、试剂的纯度、质量和稳定性的影响也是造成误差的重要因素。如标记抗原的比度、纯度,辐射自分解,抗体的稳定性,分离剂、阻断剂及缓冲液等试剂的纯度等。
三、在放射免疫分析中一些基本操作,如取样、提取、沉淀、分离以及保温条件不适当等造成的误差。由于工作人员熟练程度不同也常常带来误差,如操作移液管垂直程度、下流速度、吹气与不吹气等。工作人员草率、不按规程操作等也都可以造成误差。
四、样品误差。样品的收集方法、贮存温度、放置条件,微量样品取样的准确度,样品可能造成的污染以及样品的变性(如免疫反应活性的降低、蛋白质的变性等)也都能造成测量的误差。
五、提取及层析分离过程中的丢失。