微柱凝胶法检测不规则抗体的临床应用
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为确保临床输血安全,输血前要用能够测不完全抗体的方法筛查不规则抗体,本院从2004年6月起,运用微柱凝胶技术对需输血的患者提前筛查不规则抗体,确保了输血安全,保证了临床治疗的顺利进行,现报告如下。
1材料与方法
11试剂与仪器抗球蛋白试剂、IgG抗D血清、不规则抗体筛查细胞均由上海血液中心供应;微柱凝胶工作测试系统由长春博迅公司提供。
12标本来源选择本院2004年6月-2005年12月3600例需输血的住院患者,其中男2000例,女1600例;内科输血1303例,外科手术2297例。
13微柱凝胶试向标示好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3个微柱凝胶管中加50靗备血清,再加50靗05%相应筛红细胞,置37℃孵育10in;取出置专用水平离心机离心5in,观察结果:红细胞全部沉于微柱底部者为阴性,聚于微柱上面者为阳性(将阳性血清再用间接抗球蛋白试确证)。
14抗球蛋白试(试管法)取5支标识好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、阳性对照、阴性对照的试管,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管加5%相应筛红细胞2滴和被血清2滴,阳性对照管加5%Rh(D)阳性红细胞和IgG抗D血清各2滴,阴性对照管加5%Rh(D)阳性红细胞和AB型血清各2滴;各管37℃孵育1h后用生理盐水洗涤3次,再加抗球蛋白试剂2滴,2000r/in离心1in,观察结果:当阳性对照管和被管出现凝集,而阴性对照管不凝集时,即为阳性,说明血清中有不规则抗体存在
表19例不规则抗体筛查阳性血清与谱细胞反应的结果（略）
2结果
用微柱凝胶试筛查不规则抗体,3600例中有9例阳性,并经间接抗球蛋白试确证,其中男4例,女5例(表1)。用排除法并通过抗体特异性鉴定:1～3号患者血清中有抗D;4~7号患者血清中有抗E;8号患者血清中有抗;9号患者血清中有抗e。经询问4例男性均有输血史(2例有抗E、1例有抗D、1例有抗),2例女性只有输血史(有抗E),2例女性只有妊娠史(均有抗D),1例女性既有输血史又有妊娠史(1例有抗E、1例有抗e)。9名阳性不规则抗体者有5人为择期手术患者:2例通过自身输血顺利完成手术;2例用微柱凝胶法配出相合悬浮红细胞输注。
3讨论
我们采用微柱凝胶试筛查不规则抗体,出率为025%(9/3600),与美国03%～20%的报道相似,稍高于日本016%的报道［1］,并全部为抗球蛋白法所证实。微柱凝胶试简便快速、灵敏度高［2］,结果稳定可靠容易判断,标本用量少、易标准化,适用于临床常规不规则抗体筛。须指出的是为不影响结果判断该试要用新鲜血清标本。9例中7例有输血史或妊娠史,提示此类患者输血前作不规则抗体筛尤为重要。不规则抗体多为免疫性不完全抗体,可通过胎盘影响胎儿,妊娠妇女施行不规则抗体筛并鉴定抗体特性,可预测新生儿溶血病,为此本院已将不规则抗体筛列为产前血型血清学查常规项目。对手术受血者的不规则抗体筛查由于是在输血前3内进行,筛出阳性抗体者可以有充裕的时间鉴定其特异性,选择相配合的血液输注,一旦找不到相配合的血液,还可选择自身输血,因此可避免手术中患者急需输血时没有相合血液而措手不及。5例择期手术患者均术后恢复良好,全部康复出院。对于连续输血患者,有学者［3］主张3筛1次,以防止开始效价很低不易出,但经过输血刺激,回忆性抗体效价迅速升高而引起溶血反应。筛用谱细胞不可能包含所有抗原,对一些低频率抗原相应抗体不能出,因此“不规则抗体筛查阴性”并不等于完全没有不规则抗体;对ABO血型的误判,也不能通过抗体筛查纠正查出。因此即使不规则抗体筛查阴性,还必须用能快速测出不完全抗体的方法交叉配血,以确保输血万无一失。
4参考文献
［1］孔令宜红细胞查［M］//孔令宜,马三科,马长仁,等成份输血与临床应用沈阳:辽宁科技出版社,1994:369-429
［2］李沙,郑山根,欧阳锡林,等柱凝集技术不规则抗体的初步观察［J］中国输血杂志,1999,12(3):168
［3］胡永红,李勇抗体测和鉴定［M］//李勇,杨贵贞人类红细胞血型学实用理论与实技术北京:中国科学技术出版社,1999：139-157
473009河南省南阳市中心医院输血科
1材料与方法
11试剂与仪器抗球蛋白试剂、IgG抗D血清、不规则抗体筛查细胞均由上海血液中心供应;微柱凝胶工作测试系统由长春博迅公司提供。
12标本来源选择本院2004年6月-2005年12月3600例需输血的住院患者,其中男2000例,女1600例;内科输血1303例,外科手术2297例。
13微柱凝胶试向标示好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3个微柱凝胶管中加50靗备血清,再加50靗05%相应筛红细胞,置37℃孵育10in;取出置专用水平离心机离心5in,观察结果:红细胞全部沉于微柱底部者为阴性,聚于微柱上面者为阳性(将阳性血清再用间接抗球蛋白试确证)。
14抗球蛋白试(试管法)取5支标识好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、阳性对照、阴性对照的试管,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管加5%相应筛红细胞2滴和被血清2滴,阳性对照管加5%Rh(D)阳性红细胞和IgG抗D血清各2滴,阴性对照管加5%Rh(D)阳性红细胞和AB型血清各2滴;各管37℃孵育1h后用生理盐水洗涤3次,再加抗球蛋白试剂2滴,2000r/in离心1in,观察结果:当阳性对照管和被管出现凝集,而阴性对照管不凝集时,即为阳性,说明血清中有不规则抗体存在
表19例不规则抗体筛查阳性血清与谱细胞反应的结果（略）
2结果
用微柱凝胶试筛查不规则抗体,3600例中有9例阳性,并经间接抗球蛋白试确证,其中男4例,女5例(表1)。用排除法并通过抗体特异性鉴定:1～3号患者血清中有抗D;4~7号患者血清中有抗E;8号患者血清中有抗;9号患者血清中有抗e。经询问4例男性均有输血史(2例有抗E、1例有抗D、1例有抗),2例女性只有输血史(有抗E),2例女性只有妊娠史(均有抗D),1例女性既有输血史又有妊娠史(1例有抗E、1例有抗e)。9名阳性不规则抗体者有5人为择期手术患者:2例通过自身输血顺利完成手术;2例用微柱凝胶法配出相合悬浮红细胞输注。
3讨论
我们采用微柱凝胶试筛查不规则抗体,出率为025%(9/3600),与美国03%～20%的报道相似,稍高于日本016%的报道［1］,并全部为抗球蛋白法所证实。微柱凝胶试简便快速、灵敏度高［2］,结果稳定可靠容易判断,标本用量少、易标准化,适用于临床常规不规则抗体筛。须指出的是为不影响结果判断该试要用新鲜血清标本。9例中7例有输血史或妊娠史,提示此类患者输血前作不规则抗体筛尤为重要。不规则抗体多为免疫性不完全抗体,可通过胎盘影响胎儿,妊娠妇女施行不规则抗体筛并鉴定抗体特性,可预测新生儿溶血病,为此本院已将不规则抗体筛列为产前血型血清学查常规项目。对手术受血者的不规则抗体筛查由于是在输血前3内进行,筛出阳性抗体者可以有充裕的时间鉴定其特异性,选择相配合的血液输注,一旦找不到相配合的血液,还可选择自身输血,因此可避免手术中患者急需输血时没有相合血液而措手不及。5例择期手术患者均术后恢复良好,全部康复出院。对于连续输血患者,有学者［3］主张3筛1次,以防止开始效价很低不易出,但经过输血刺激,回忆性抗体效价迅速升高而引起溶血反应。筛用谱细胞不可能包含所有抗原,对一些低频率抗原相应抗体不能出,因此“不规则抗体筛查阴性”并不等于完全没有不规则抗体;对ABO血型的误判,也不能通过抗体筛查纠正查出。因此即使不规则抗体筛查阴性,还必须用能快速测出不完全抗体的方法交叉配血,以确保输血万无一失。
4参考文献
［1］孔令宜红细胞查［M］//孔令宜,马三科,马长仁,等成份输血与临床应用沈阳:辽宁科技出版社,1994:369-429
［2］李沙,郑山根,欧阳锡林,等柱凝集技术不规则抗体的初步观察［J］中国输血杂志,1999,12(3):168
［3］胡永红,李勇抗体测和鉴定［M］//李勇,杨贵贞人类红细胞血型学实用理论与实技术北京:中国科学技术出版社,1999：139-157
473009河南省南阳市中心医院输血科
