核酸扩增出现不规则曲线是什么原因？

标准答案在此：

解决方案： ①加样时减少气泡产生 ；②上机前注意弹掉气泡再离心。

这条完全是s型，线条也不平滑说明模板浓度也有问题，ROX可能也有问题

从人，机，料，法，环找下原因：操作流程是否正确，加样孔有无异常，加样中有无气泡干扰，电压是否稳定。该批次重新实验。

pcr反应刚开始的时候，因为信号比较低，所以会出现基线不稳，问题不大的，但是后面那两个变形的曲线，感觉是primer不好使，或者是孔有问题。

如果使用的PCR反应板封膜质量不好，在PCR过程中受到水蒸气的影响，容易产生变形。

原因分析：

（1）仪器不稳定导致的扩增曲线异常 （也可能突然停电或者电压不稳） 。

（2）尖峰向下，可能是卤素灯老化所致发射光源不稳定 （指卤钨灯光源的激发器） 。

（3）尖峰向上，考虑仪器或者孔位问题，还要考虑反应体系是否存有气泡

解决方案：

（1）检查仪器性能，检查实验室电压情况。

（2）定期仪器保养维修，避免配件老化问题出现。

（3）检查问题孔位，排除孔位问题。

（4）配制反应体系，分装避免产生大量气泡。模板加完，微孔板离心再扩增。

加样过程中出现了漏加或者ROX加的不合理