精密度评价和方法比较中NCCLS评价方案的应用
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作者:杨昌国 许叶 张抗
单位:杨昌国 许叶(宁波市临床检验中心,浙江宁波315000);张抗(上海海员医院)
建立一个新的分析方法,或引进新的方法,试剂和仪器都应对它们的技术性能如精密度,方法比较,线性范围,以及干扰等作出评价。美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)制订了一套评价方案(evaluation protocols),能客观而正确地对上述技术性能作出评价。近年,国外发表的方法学研究和评价研究中采用上述评价方案者逐渐增多,笔者在访美时得到这套文件,开始在方法学研究中应用,现将精密度评价和方法比较的应用实例介绍于下。
1 精密度评价[1]
1.1 目的 评价分析方法、试剂和仪器给出结果的可重复程度,反映精密度好坏的指标是变异系数CV。CV越小精密度越好,反之则差,故有人称其不精密度。用本方案评价可以计算出批内、批间、日间和总CV,其中总CV最重要,它代表整个分析体系的可重复程度。
1.2 评价前的准备
1.2.1 对于评价对象(如新建立的方法,或新引进的方法,试剂和仪器)均应有一个熟悉过程,对评价方案亦应熟悉。
1.2.2 实验用的试剂应是同次配制,商品试剂盒和参考物应为同一批号,仪器应处于良好的工作状态。
1.2.3 精密度实验用的标本 一般选择2个(亦可更多),一个在正常范围或在医学决定水平附近,另一个为异常值,被测物在||疾病时增高者用高值,降低者用低值。实验标本的介质(matrix)应与临床标本一致,并应妥善保存,应保证在整个实验过程中稳定。
1.2.4 先作一个初步的批内精密度测定,即一个标本重复测定20次,计算出均值,标准差和变异系数。
1.3 评价步骤 以甘油三酯定值血清的精密度评价为例。
1.3.1 数据测定 2个标本每天测定2次(2次测定间隔不得少于2小时),每次测定均作双份,共测定20天。每次测定至少做一个质控。
1.3.2 数据整理于表1。
表1 实验数据整理和几项计算(甘油三酯低值质控血清,mmol/L)
天数 | 次数Ⅰ | 次数Ⅱ |
次数Ⅰ
平均
|
次数Ⅱ
平均 |
日
平均 |
||
结果1 | 结果2 | 结果1 | 结果2 | ||||
1 | 0.960 | 0.950 | 0.990 | 0.980 | 0.955 | 0.985 | 0.978 |
2 | 0.920 | 0.930 | 1.010 | 1.010 | 0.925 | 1.010 | 0.968 |
3 | 0.986 | 1.014 | 1.010 | 0.960 | 1.000 | 0.985 | 0.992 |
18 | 0.948 | 0.920 | 0.955 | 0.937 | 0.934 | 0.946 | 0.940 |
19 | 0.908 | 0.936 | 0.890 | 0.917 | 0.922 | 0.904 | 0.913 |
20 | 0.889 | 0.944 | 0.901 | 0.920 | 0.917 | 0.910 | 0.914 |
1.3.3 离群点的检查 如每次双份测定的差值超过初步精密度测定时±标准差的5.5倍(是99.99%的上限值),这对数据为“离群点”,应弃去或重做。
1.3.4 统计分析 见表1、2和计算公式。本例的批内CV为2.23%,批间CV为2.46%,日间CV为3.48%,总CV为4.19%。日平均均值=0.949 s日间(B)=0.033
CV日间=B/日平均均值×100%=3.48%
n=测定天数
CV批间=A/日平均均值×100%=2.46%
CV批内=s批内/日平均均值×100%=2.23%
CV总=s总/日平均均值×100%=4.19%
表2 实验数据的几项计算
天数 |
次数Ⅰ
(结果1—2)2 |
次数Ⅱ
(结果1—2)2 |
次数Ⅰ平均-
次数Ⅱ平均
|
1 | 0.0001 | 0.0001 | 0.0009 |
0.0001 | 0.0000 | 0.00723 | |
3 | 0.000784 | 0.0025 | 0.000225 |
18 | 0.000784 | 0.000324 | 0.000144 |
19 | 0.000784 | 0.000729 | 0.000324 |
20 | 0.003025 | 0.000361 | 0.000049 |
∑ | C=0.0149 | D=0.0210 | E=0.0218 |