固相膜免疫-检验技士考试辅导
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概念
固相膜免疫与ELISA相类似,其特点是以微孔膜作为固相。固相膜的特点在于其多孔性、非共价键高度吸附抗体或抗原和易于漂洗等,固相膜像滤纸一样,可被液体穿过流出,液体也可以通过毛细管作用在膜上面向前移动。标志物可用酶或各种有色微粒子。利用这些特点建立了多种类型的快速检验方法。
常用的固相膜
固相膜免疫测定中常用的膜为玻璃纤维素(fiberglass)膜、尼龙(nylon)膜、锯偏氟乙烯(PVDF)膜和硝酸纤维素(NC)膜等。其中最常用的为NC膜。
固相膜的技术要求
1.孔径 即能通过粒子的大小,以微米表示。用于穿流法的膜一般选择0.4微米左右,用于横流法的膜可选择5-10微米。
2.流速 以ml/(cm2·min)表示。流速与孔径有一定关系,孔径大,流速快。在横流法中选择合适的膜时,流速较孔径更有参考价值。
3.蛋白质结合力 吸附力很强,以UG/CM2表示。
4.均一性 优质的膜应具有良好的均一性,这样才能保证试剂批内的均一性。