血培养假阳性的原因及对策
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色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理,监测溶于培养基中的二氧化碳(CO2)的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度(PH)改变,从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料(Liquid Emulsion Sensor , LES)颜色变浅,通过照射感应器连续采集信号后形成反应曲线进行分析,采用初始阈值法、斜率法及加速度法三种运算法则及时得到阳性信号。
临床工作中仪器显示阳性报警,而涂片染色未见细菌,转种平板无菌生长为假阳性。导致假阳性出现的原因可能有:
一、环境因素:
1.温度:实验室室温的变化(如开关空调导致的温度骤然变化、空调直对仪器吹风等)导致反应曲线下滑或上升引起仪器报阳。
2.供电:仪器连接的电源电压不稳定或同一电源下连接其它频繁使用的大功率仪器会导致反应曲线波动,引起仪器报阳。
3.位置:放置在长期开窗旁边的仪器,由于孵育孔内容易吸附大量粉尘遮蔽测试光源,导致采集信号变化出现假阳性。
二、仪器或培养瓶因素:
1.仪器:定期保养仪器,校正孵育孔的本底信号值(difference值)保证仪器稳定的工作状态,减小假阳性瓶出现的概率。
2.血培养瓶:使用前检测血培养瓶是否出现损坏、培养基或底部变色等,查看新的血培养瓶是否常温避光保存,阳光直射会导致瓶底颜色的变化。
三.标本因素:
1.细胞本身也能发酵产生CO2,在抽血量超过推荐采血量或推荐采血量下含有大量的细胞(如白血病、真红细胞增多症等疾病)的情况下会导致假阳性的出现。
2.某些少见的苛养微生物可能在血培养瓶生长培养基中难以生长。
3.当仪器信号显示阳性时,需快速取出阳性瓶,以避免某些细菌(如肺炎链球菌)由于自我分解或其它原因引起无活性培养。
4.某些原因(酸中毒、输入大量液体)导致标本本身PH值偏酸性导致出现假阳性。
四.操作原因:
1.匿名瓶上机:不同种类的培养瓶的初始阈值不同,而仪器在处理匿名瓶时采用的是最低的阈值开始计算,触动初始阈值的运算法则导致仪器报阳。
2.装瓶后孵育箱未及时关闭导致温度变化引起的假阳性。
3.上机过程中未把培养瓶塞到底部。
4.标本瓶瓶底有油污、染料、玻璃片等物体覆盖,导致仪器报阳。
出现假阳性后可按下列步骤进行分析查找原因:
1.查看仪器是否有报警:排查仪器状态、操作失误和温度变化等引起的原因。
2.查看瓶底颜色变化:排查由于环境问题(电压、温度)、标本保存或瓶底污染引起的假阳性。
3.查看生长曲线:通过不同的生长曲线图形排查操作、标本、环境等因素的原因。
4.查看临床病历,追溯标本采集、运输等过程。
血培养是临床诊断败血症的重要方法,阳性结果对明确诊断、对症治疗有极高的应用价值。对临床出现的假阳性瓶,应及时处理并寻找原因,制定相关制度对血培养的质量持续改进,提高阳性率和报告的准确性。