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【求助】细胞凋亡

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各位战友,如何做凋亡通路?需要测哪些指标?如何证实动物是由于凋亡过度造成死亡的?谢谢!
你好!凋亡的检测指标非常多,比如说Hoechst 染色,形态学观察,流式,Tunnel,DNA-ladder等等,其中凋亡检测的金标准为TUNNEL和DNA-ladder,这两者 都可以定性和半定量表达凋亡的发生及其凋亡量的变化!
我觉得凋亡检测的金标准应该是电镜结果,tunnel不应算是金标准,因为容易出现假阳性,另外现在DNA ladder基本已经不用了,因为并非所有的细胞凋亡都会出现ladder。所以我认为凋亡检测最好有电镜结果,如果没有的话可以用annexin v-pi双染进行早期凋亡和晚期凋亡的检测,然后加上western的凋亡蛋白定量表达结果(BCl-2,bcl-xl,bax,bad,caspase系列)这样做即定量,又可以区分早期和晚期凋亡,此外还有利于解释凋亡的发生机制,应该比较好。
各位战友好!如果要动态观察细胞内外的Aβ变化及其与凋亡的关系,应该检测哪些相关的酶及蛋白表达,方法如何?
各位战友好!如果要动态观察细胞内外的Aβ变化及其与凋亡的关系,应该检测哪些相关的酶及蛋白表达,方法如何?
凋亡蛋白定量表达结果如何做?是在不同时相采集细胞吗?如果要做线粒体途径的话需要做哪些指标?死亡受体途径呢?测BCl-2,bcl-xl,bax,bad,caspase系列能区分早期和晚期凋亡?

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师兄微信号:shixiongcoming

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