【求助】问个可以转joke的问题:qrt-pcr,western的细胞用量
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1,请问用多少细胞就能做出qrt-pcr呢?小笨的研究对象是被化疗药打到粒缺的肿瘤病人,最少的目标细胞理论上只有300个细胞/ml血,也不知道磁珠能不能不能把它们分出来.
2,同样的细胞做western行么,如果蛋白表达量是跟notch的差不多呢?
3,请问这样的问题如何解决:总RNA做相对定量qrt-pcr,但是表达的细胞只占一定比例x%,怎样将结果校正到对应表达的这部分细胞?
2,同样的细胞做western行么,如果蛋白表达量是跟notch的差不多呢?
3,请问这样的问题如何解决:总RNA做相对定量qrt-pcr,但是表达的细胞只占一定比例x%,怎样将结果校正到对应表达的这部分细胞?
根据本人所知，一个细胞的RNA量就可以做实验，但是所有步骤地条件应该是你的实验室达不到的，所以你还是想想如何提高你的样本量。在此种情况下，针对于realtime你是可以的，但是western是不可能的。
看了你问的问题后，觉得有点奇怪，你的实验室能够达到什么样的水平，为什么你要选这样的课题？在实验技术达不到的情况下我觉得你还是考虑清楚一点，因为你的方法可能就是一种编辑不认可的东西？
看了你问的问题后，觉得有点奇怪，你的实验室能够达到什么样的水平，为什么你要选这样的课题？在实验技术达不到的情况下我觉得你还是考虑清楚一点，因为你的方法可能就是一种编辑不认可的东西？
zhujoker wrote:
根据本人所知，一个细胞的RNA量就可以做实验，但是所有步骤地条件应该是你的实验室达不到的，所以你还是想想如何提高你的样本量。在此种情况下，针对于realtime你是可以的，但是western是不可能的。
看了你问的问题后，觉得有点奇怪，你的实验室能够达到什么样的水平，为什么你要选这样的课题？在实验技术达不到的情况下我觉得你还是考虑清楚一点，因为你的方法可能就是一种编辑不认可的东西？
题目是老板看到关于这个分子的报道后选的,就是测t细胞里的表达量,然后对比对比.
实验室的条件再好也没用,我本人没做过实验,但是短期做出这样的实验是我必须面临的问题:-(一切自己摸索,所以特别绝望.
呵呵，这些实验对于新手来说还是难度比较大的，需要慎重。
嗯,我也很迷茫,比较明白的前辈都在医院累得死去活来,不敢打扰.
比较厉害的实验室近在咫尺因为各种体制原因不能去跟着做.
还有钱的原因.
所以从细胞分离到qrt-PCR到western我大概得自己摸,还望发帖问令大牛们汗颜问题的时候能指个进一步学习的路.
比较厉害的实验室近在咫尺因为各种体制原因不能去跟着做.
还有钱的原因.
所以从细胞分离到qrt-PCR到western我大概得自己摸,还望发帖问令大牛们汗颜问题的时候能指个进一步学习的路.
版主zhujoker留言:
看来你就是医院的，不是做实验的。所以我觉得有时候个人怎么处理比较重要，至于说实验室与实验室的隔阂其实是你老板他们的问题，你有时间和精力还是要去请教人家的。
看来你就是医院的，不是做实验的。所以我觉得有时候个人怎么处理比较重要，至于说实验室与实验室的隔阂其实是你老板他们的问题，你有时间和精力还是要去请教人家的。
呵呵，慢慢摸索吧，祝好运~~
woxingwosu wrote:
呵呵，慢慢摸索吧，祝好运~~
哎,可是我只有6个月的时间呀
谢谢祝福
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