[原创]分子生物学实用技术DIY方案
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技 术 转 让
(1) 高效Taq酶菌株:该菌株所含质粒源于pTAQ,TAQ基因经过几次点突变,扩增效率更高。制备简单质量稳定,扩增片段能达到8Kb。提供制备工艺(粗酶制备和精酶制备工艺两套protocol,以及质粒信息)。同时提供相关文献。
(2) 制备T-Vector 的菌株,该菌株所含质粒由pGEM-T easy 改造而成,经XcmI 酶切后形成T-vector(与pGEM-T easy只有几个碱基的差异,而多克隆位点没有任何差异),该方法易于大量制备,且效果稳定。同时赠送经典平末端酶切,Taq 酶加T的方案。同时提供相关文献。
(3) GC Buffer(PCR enhancer)的配方: 对于GC含量高的模板的PCR扩增, 目前尚没有通用的有效试剂。提供四种PCR enhancer方案(分别来自宝生物的GC Buffer、Qiagen 的Q-solution、 Stratagene的Taq Extender和Perfect Match PCR Enhancer),每种可单独使用亦可搭配使用。同时提供相关文献。
(4) Trizol (RNAeasy、Biozol、Tri reagent): 上述几种试剂的核心配方几乎一样,为了避免专利纠纷而分别命名。提供 Trizol经典专利配方,及两种最新优化配方(改进方案直至2002年)。上述配方均被各大实验室广泛采用。试剂成本低,配制简单, 质量稳定。同时提供相关文献。
(5) M-MLV 反转录酶菌株。已经点突变去除了RNase H 活性,反转录长度可达4Kb,质量可靠。(粗酶制备和精酶制备工艺两套protocol,以及质粒信息)。同时提供相关文献。
(6) DNA胶回收试剂盒中 Binding buffer 和 Wash buffer的配方:一旦掌握,不仅可以自己买离心柱做 DNA胶回收试剂盒, 而且所买的高质量DNA胶回收试剂盒中的离心柱可多次重复使用,而不影响回收效率。同时提供相关文献。
以上各项均提供正式发票, 用后不满意,无条件退款。
核酸分子量标准 质粒(通用系列):
GM7、 GM5、 GM4、 GM3、 GM3j
简单单酶切所产生的核酸分子片段长度:
GM7:7000、2000、1400、1000、800、600、400+400
GM5:5000、2000、1400、1000、800、600、400+400
GM4:4000、2000、1400、1000、800、600、400+400
GM3:3000、2000、1400、1000、800、600、400+400
GM3j:3000、 1500、900、700、500、300+300、
GM7、 GM5、 GM4、 GM3四个质粒组合在一起是一个非常好的200bp ladder, 可以广泛的应用于日常分子生物学实验中。同时当需要对未知片段进行更精确的标定时可以与GM3j一起使用(建议在两个泳道中分别使用以便效果更为直观), 形成一个覆盖范围颇广的100bp ladder。该核酸分子量标准系统制作简单,覆盖范围大,成本低廉。质粒源于PUC19系列, 拷贝数高。只需一种廉价酶的一次酶切。 建议生产菌株用DH5 或XL-BLUE。
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期刊:Nature: 2005合集、Science: 2005合集、Cell: 2005合集
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