流式细胞仪的保养和常见故障的排除

流式细胞术（flow cytometry，FCM）自70年代中期就成为研究细胞生物学的重要技术，至今己被广泛应用于肿瘤学、免疫学、血液学、药物学等领域。FCM能对大数量的单个细胞同时进行多个物理和化学参数检测，其中包括细胞的大小、细胞内颗粒、细胞复杂性和细胞的相对荧光强度等。

我科使用美国BD公司生产的FACSC-ALIBUR流式细胞仪已有1年多，我们认为该仪器的性能稳定，操作简便，电脑软件设计较为合理，测试结果重复性好，故障率较低。

流式细胞仪由液流、光学和电子学3个基本部分组成。在日常的使用中该仪器多在液流部位出现故障，其一般的故障可以自行处理，但在光学、电子学方面的故障由于技术性较强，建议最好请厂家维修。为使同行们了解该仪器的日常保养和常见故障的排除方法，现将我们在实践中的解决办法作如下介绍。

一、日常保养

由于该仪器比较昂贵且精密，操作人员使用不当就很容易使液流部位出问题，所以需要加强日常的保养工作。

1、所用溶液都要进行过滤处理，样本在上机前也要过滤，以免时间久了出现沉淀物而堵塞喷嘴。

2、开机后检测样本前，要用prime机检查喷嘴的畅通状况。

3、每日关机前移开托臂，用3～4管10%次氯酸钠反复冲洗，不要让有堵塞的喷嘴带病运行，使用经过滤处理的H2O或PBS冲洗后才关机。

4、每天要倒空废液瓶内的废液，再注入少量的次氯酸钠或消佳净溶液，以防细菌生长。

5、鞘液瓶内的液体加至4/5容量并放置一夜，防止新加入的液体有气泡产生而影响检测结果。

二、流式细胞仪常见故障的排除

1、仪器长时间不能进入ready状态：这种情况可能是试管有裂缝导致漏气、鞘液罐的接口漏气、喷嘴上的胶圈破损及老化，或电源部分有故障，都应逐个排除。如果按仁述方法也未能排除故障，需请厂家来维修。

2、喷嘴堵塞：该故障在操作中较多出现。日常的喷嘴在prime机时喷出一道水柱，如果喷出的是气泡，则说明喷嘴有堵塞，气泡越大堵塞越严重。排除故障的步骤：①放开托臂，用10%的次氯酸钠反复冲洗再放回托臂机，如果故障还未排除就应关掉主机。

②用的注射器接上胶管套，在喷嘴上反复抽吸，一般堵塞现象可以排除。

③如果注射器抽吸无效，则要小自取下喷嘴。此操作最好由厂家的维修人员或熟练的工作人员进行，以免撞弯了喷嘴。喷嘴用注射器套上冲洗，直至喷嘴喷出的水柱呈直线为止。④如果喷嘴堵塞经上述淀查病后的水柱呈直线为止。

④如果喷嘴堵塞经上述3个步骤还不能解决，可以用超声波仪清洗。清洗时喷嘴两头应套上试管，以防碰弯。先将喷嘴浸入的10%次氯酸钠中超声1h，然后用过滤后H2O的再超声1h，经过此步骤清洗的喷嘴都会消除堵塞现象。注意不到万不得己时不要拆下喷嘴清洗，因为反复的拆卸会增加喷嘴损坏的可能性。

实践证明，做好仪器的日常保养是保证检验质量的重要措施。喷嘴的堵塞问题尤其会影响DNA的图像，使测试结果无法分析。只有严格执行操作规程，才能使仪器达到最好的使用效果，发挥其最大的社会效益和经济效益。