蛋白质呈色反应—双缩脲反应实验

【实验原理】

当尿素经加热至180℃左右时，两分子尿素脱去一分子氨，

进而缩合成一分子双缩脲。

其在碱性条件下双缩脲与铜离子结合成红紫色络合物，此反应称为双缩脲反应。

多肽及蛋白质分子结构中均含有许多肽键，其结构与双缩脲分子中的亚酰胺键相同。因此，在碱性条件下与铜离子也能呈现出类似于双缩脲的呈色反应。其反应过程如下：

【 试剂 】

1. 蛋白质溶液（鸡蛋清用蒸馏水稀释10倍，通过2-3层沙布滤去不容物）

2.0.1%甘氨酸溶液

3. 0.01%精氨酸溶液

4. 10%NaOH溶液

5. 1%CuSO4 溶液

6.尿素结晶

【实验操作】

1. 双缩脲的制备

取少许尿素结晶 (约火柴头大小)放入干燥的试管中，微火加热至尿素熔解至硬化，刚硬化时立即停止加热，此时双缩脲即已形成。冷却后加10%氢氧化钠溶液约1ml、并震荡，再加入1%硫酸铜溶液2滴，再震荡，观察颜色的变化。

注意：

a.在操作过程中试管不能冲向其他人以防止烫伤；

b.控制加热的时间既不能过长也不能过短；

c.加热时火不能太大，防止碳化。

2. 观察现象

另外取试管4支，按照下表加入各种 试剂 ，观察并解释现象。