原理
凡分子中含有两个甲酰胺基（－CONH2－）的化合物都能与碱性铜溶液作用，形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健（－CONH2－）都能起此反应，而且各种血浆蛋白显色程度基本相同．
材料与仪器
步骤
一、实验操作：按表进行
混匀，置25℃30min。（37℃10min）在波长540nm。 比色杯直径1.0cm以空白管调零、读取各管光密度。
二、计算
血清总蛋白g/L＝测定管（或校正）吸光度/标准管吸光度×蛋白标准液浓度（g／L）
混匀，置25℃30min。（37℃10min）在波长540nm。 比色杯直径1.0cm以空白管调零、读取各管光密度。
二、计算
血清总蛋白g/L＝测定管（或校正）吸光度/标准管吸光度×蛋白标准液浓度（g／L）
注意事项
1、血清蛋白质含量一般用g/L表示，因各种蛋白质的分子量不同，不能用mol/L表示。
2、酚酞、溴磺酞钠在碱性溶液中显色影响双缩脲测定结果，右旋糖酐可测定管浑浊亦影响结果，理论上这些干扰均可用相应的标准空白管来除，如标准空白管吸光度太高，可影响到定的准确度．
3、含脂类极多的血清，显色应浑浊不清，可用乙酸3.l抽提后再进行比色。
参考值：60－80g／L
2、酚酞、溴磺酞钠在碱性溶液中显色影响双缩脲测定结果，右旋糖酐可测定管浑浊亦影响结果，理论上这些干扰均可用相应的标准空白管来除，如标准空白管吸光度太高，可影响到定的准确度．
3、含脂类极多的血清，显色应浑浊不清，可用乙酸3.l抽提后再进行比色。
参考值：60－80g／L
来源：丁香实验
