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丁香通

蛋白质和三氯乙酸/苦味酸的反应原理?

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dxy_mdyn7fm

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3 个回答

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bamboopiggy

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蛋白质和三氯乙酸的反应是不可逆的。生物碱是植物中具有显著生理作用的—类含氮的碱性物质。凡能使生物碱沉淀,或能与生物碱作用产生颜色反应的物质,称为生物碱 试剂 。如鞣酸、苦味酸和磷钨酸等。当蛋白质溶液pH值低于其等电点时,蛋白质为阳离子,能与生物碱 试剂 的阴离子结合成性盐而沉淀。溶液中的蛋白亦能被有机酸沉淀,其中以三氯醋酸的作用最为灵敏而且特异

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秋秋欣欣

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① 在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐;

② 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀;

③ 随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显;

④ 电泳图谱显示,BSA、HSA 单体谱带有较明显的展宽现象,这可能是由于TCA 的结合,使SDS 与蛋白质的结合量产生偏差,从而造成蛋白质所带电荷的不均一性,造成迁移率的不一致。

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丁香清香

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三氯乙酸与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:
①在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐.
②作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团,使之聚集沉淀.
③随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显; 在电泳时使用TCA对蛋白质样品的浓缩或除盐时,对于分子质量大的蛋白质,要慎重选择TCA.

苦味酸,化学名为2,4,6-三硝基苯酚,受硝基吸电子效应的影响而有很强的酸性,并具有强氧化性。在苦味酸的酸性和强氧化性的作用下,会造成蛋白质发生变性。

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