木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的区别
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问:木瓜蛋白酶和胰蛋白酶在消化组织块上有什么区别吗?哪一个效果更好?
答:常用的细胞消化液为胰蛋白酶(Trypsin),其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接,使组织或细胞片分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
木瓜蛋白酶(Papain)是从木瓜果实中提炼而得的纯天然生物酶,简称木瓜酶;木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶,分子量为27000u,由一种单肽链组成,含有212个氨基酸残基。至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位,他们分别是Cys25、His159和Asp158,另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。
木瓜蛋白酶对动植物蛋白、酯、酰胺等有非常强的水解能力,是一种广谱酶制剂,对卵白蛋白、酷蛋白的最适作用PH值是7,木瓜蛋白酶属巯基蛋白酶,可水解蛋白质和多肽中精氨酸和赖氨酸的羧基端。并能优先水解那些在肽键的N一端具有二个羧基的氨基酸或芳香L一氨基酸的肽键。还可以通过切断壳聚糖的B一(1,4)糖苷键,降解植物细胞壁中的壳聚糖。它分解比胰酶更多、更广泛的蛋白底物。
略溶于水、甘油,水溶液无色或淡黄色,有时呈乳白色;几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。最适合PH值5.7(一般3~9.5皆可),在中性或偏酸性时亦有作用,等电点pI8.75;最适合温度55~60℃(一般10~85℃皆可),耐热性强,在90℃时也不会完全失活,易受重金属离子( Fe3+ 、 Cu2+ 、 Hg+ 、 Pb+ 等)和氧化剂的抑制及破坏作用,还原性物质激活。细胞消化同样可以用 0.1mol/L 的磷酸缓冲液, pH 7.2 配制。
哪个效果更好,要看你具体消化什么样得细胞了!