原理
胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞相互离散。胰蛋白酶的活力是用解离酪蛋白的能力表示的。
材料与仪器
胰蛋白酶
D-Hanks Dulbecco NaHCO3
滤纸 玻璃棒
D-Hanks Dulbecco NaHCO3
滤纸 玻璃棒
步骤
1. 将D-Hanks液或Dulbecco盐溶液高压消毒灭菌,用NaHCO3液调节pH 至7.2左右;
2. 称取胰蛋白酶粉末置烧杯中,先用少许消毒的盐溶液调成糊装,然后再补足盐溶液,搅拌混匀,置室温4 小时或冰箱内过夜,并不时搅拌振荡;
3. 次日先用滤纸粗滤,再进行过滤除菌,分装入瓶中,低温冰箱保存备用,常用浓度为0.25%或0.125%;胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可调pH至7.2左右。
2. 称取胰蛋白酶粉末置烧杯中,先用少许消毒的盐溶液调成糊装,然后再补足盐溶液,搅拌混匀,置室温4 小时或冰箱内过夜,并不时搅拌振荡;
3. 次日先用滤纸粗滤,再进行过滤除菌,分装入瓶中,低温冰箱保存备用,常用浓度为0.25%或0.125%;胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可调pH至7.2左右。
来源:丁香实验