组织培养常用液的配制实验

实验分类：

生物化学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

包括分离组织和分散细胞用的消化液、调整培养液酸碱度的pH 调整液、防止发生污染的抗生素溶液、检查细胞和观察研究细胞的各种染液，以及检查各种用液是否有污染的细菌培养基等。内容来源：组织培养和分子细胞学技术。（北京出版社）

来源：丁香实验

操作方法

胰蛋白酶溶液的配制法

1. 将D-Hanks液或Dulbecco盐溶液高压消毒灭菌，用NaHCO3液调节pH 至7.2左右； 2. 称取胰蛋白酶粉末置烧杯中，先用少许消毒的盐溶液调成糊装，然后再补足盐溶液，搅拌混匀，置室温4 小时或冰箱内过夜，并不时搅拌振荡； 3. 次日先用滤纸粗滤，再进行过滤除菌，分装入瓶中，低温冰箱保存备用，常用浓度为0.25%或0.125%；胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可调pH至7.

pH调整液的配制实验

一、NaHCO3液 1. 常用的浓度有7.4%、5.6%、3.7%三种，配制时，用三蒸馏水溶解后，过滤除菌，分装小瓶，盖紧瓶塞，4 ℃冰箱或室温下保存。 2. 或用10 磅10 分钟高压蒸气灭菌亦可；可能有部分NaHCO3被破坏，但操作简单方便。 3. 消毒后要迅速封上瓶口，以免CO2逸出。 4. 调节溶液pH时，NaHCO3液要逐滴加入，并不时搅动培养液，以防加入过量，