骨髓间充质干细胞形态能否做细胞鉴定和转染实验

cai_xiehe： 各位战友，帮我看一下我们的培养的第二代SD大鼠骨髓间充质干细胞形态如何，能否拿去做流式细胞鉴定和慢病毒载体转染实验，万分感谢！

再发一张也是第二代SD大鼠骨髓间充质干细胞图片

丁香园网友 huli317 认为：

想问问你这细胞是传代后多久的？

这细胞形态真的太差了，特别是第二代就这种形态，你接下来的实验怎么完成啊

用作流式检测以及病毒感染都要细胞状态非常好，你要做流式怎么也得4到5代吧，此时的形态其实跟原代的长梭形漩涡状差不多。

楼主可能是细胞传代时没把握消化时间和吹打力度。一般0.25%的胰酶镜下消化至圆后轻轻吹打瓶体将细胞吹散分瓶。

丁香园网友 huli317 认为：

给你看一张我第4代的MSCs

丁香园网友 cai_xiehe 认为：

谢谢楼上huli317战友的解答，所上传的照片是SD大鼠骨髓间充质干细胞第二代传代后第4天照的，还想请问一下，传代时0.25%的胰酶一般需要消化多久时间，吹打时如何把握力度（因为有人说吹打时产生气泡太多会对细胞形态有影响，该如何避免产生气泡）？

丁香园网友 huli317 认为：

0.25%的胰酶（不含EDTA，冬天放在37度预热，夏天可放在室温预热）镜下消化至圆后可将瓶体（细胞面）朝上摆，以免细胞飘起，弃胰酶时也是让胰酶沿着另一面到弃，加含血清的培养基终止消化，用弯头吸管轻轻吹打，吹打时速度别太快，防止气泡产生就是在别一口气把吸管里的液体全吹出去，还有吸液体时速度稍慢些，等吸球没负压时再将吸管提离液面进行吹打，别吹到瓶内的培养基（你可以将细胞面朝上），吹打时要顺序吹，从左到右，从上到下。一比二传，一般两天长满。在60小时还没长满的话，我一般都不会用，将其弃去。

另外：我用的都是75毫升的培养瓶