在大肠杆菌 中，当外源蛋白高水平表达的时候，极易形成包涵体，为蛋白纯化 等下游工作带来很大的麻烦。
下面是一些可以参考的有助于提高目的蛋白可溶性表达的实验 方案：
1. 降低蛋白合成的速度。
可以通过以下方法实现：
a. 降低培养温度
b. 使用弱启动子
c. 使用低拷贝数的质粒 表达载体
d. 降低诱导物的浓度
2. 改变培养基 。
a. 培养基中加入可以帮助蛋白折叠的因子
b. 加入缓冲液保持pH稳定
c. 加入1%的葡萄糖，抑制lac启动子
d. 加入山梨糖醇等可以稳定蛋白天然结构的因子
e. 加入乙醇， thiols and disulfides等
3. 与分子 伴侣或折叠酶共表达。
常用的分子伴侣有：
GroES-GroEL
DnaK-DnaJ-GrpE
ClpB
常用的折叠酶有：
peptidyl prolyl cis/trans isomerases (PPI's)
disulfide oxidoreductase (DsbA) and disulfide isomerase (DsbC)
protein disulfide isomerase (PDI)
4. 分泌表达。使目的蛋白分泌到周质空间。
周质空间的氧化性的环境有利于二硫键的形成，而胞内则是还原性的。
周质空间有折叠酶DsbA和DsbC的存在，帮助蛋白正确折叠。
周质空间很少有蛋白酶存在，不会被水解。
可以使对细胞 有毒性的蛋白大量存在。
5. 使用特定的菌株 。
AD494, which has a mutation in thioredoxin reductase (trxB).
Origami ，a double mutant in thioredoxin reductase (trxB) and glutathione reductase (gor).
6. 与可溶性partner融合表达。
7. 表达目的蛋白的一个片段 。> 70 kDa的蛋白在大肠杆菌中是很难表达的。
8. 体外去折叠，重新折叠。
(责任编辑：大汉昆仑王)
