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实验动物寄生虫监测标准操作规程(SOP)

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名称:实验动物寄生虫监测标准操作规程(SOP)

关键词:实验动物寄生虫监测

目的:规范实验动物寄生虫监测的具体过程,确保监测结果可靠。

主体内容:

实验动物的寄生虫种类繁多。从寄生虫分类学角度,可分为原虫、蠕虫及节肢动物,蠕虫又可分为吸虫、绦虫和线虫。从宿主角度,可分为小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、猫、犬及灵长类的寄生虫。从寄生部位,又可将寄生虫分为体内寄生虫与体外寄生虫。

1. 体外寄生虫检查方法

(1)观察法:用肉眼观察或借助于放大镜对动物进行仔细观察,体外寄生虫感染严重时,可引起动物脱毛、毛糙甚至由于瘙痒引起溃疡、结痂,检查时尤其注意动物易感染部位,如耳根、颈后、眼周、背部、臀部及腹股沟等。用梳子梳理动物毛发,可发现虱、蚤等节肢类寄生虫。

(2)透明胶带粘取法:适用于大、小鼠,将2cm宽的透明胶带剪成与载玻片近等长的胶条,粘取动物毛发,查螨。

(3)被毛检查法:取宿主易感染部位被毛少许,加一滴生理盐水后加盖玻片,镜下观察有无虫体。

(4)皮屑刮取法:用刀片刮取宿主感染部位,尤其是出现溃疡或结痂处,用力刮取深层屑片,置于载玻片上,加两滴10% NaOH溶液使之液化(或两滴甘油使之透明),加盖玻片镜检。此法适用于疥螨和痒螨的检查。

2. 体内寄生虫

(1)肠道寄生虫:采取粪便,用肉眼观察有无可见线虫、吸虫或绦虫的节片,然后将粪便直接涂片检查虫卵、包囊及原虫。也可采用以下方法检查:

①饱和盐水漂浮法:在有粪便标本的漂浮管内加少许饱和盐水,调匀,再加饱和盐水至漂浮管3/4处,放置3~5 min,挑去粗渣后,加饱和盐水至液面高出管口,静置20 min,用盖玻片轻轻压于液面,垂直提起,放在载玻片上镜检。

②离心沉淀法:将标本加入离心管内,以1500 rpm 离心15 min,弃去上清液,将剩余少许液体与沉淀混匀,用吸管吸出滴在载玻片上,加盖玻片镜检。

③解剖动物:解剖动物,从肠道收集标本。

(2)组织内寄生虫:在解剖动物时,对疑为寄生虫感染的部位做组织压片、切片检查。

血液寄生虫 实验动物的血液寄生虫极为罕见,从野外捕获或有野外媒介昆虫侵入的饲养环境中的动物不排除血液寄生虫的感染。检查时,取末梢血、静脉血或骨髓制成涂片,染色后镜检。

此外,用于微生物学检查的多种免疫学方法均可检查寄生虫。

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