简介
使用商业化的跑轮装置,在长时间的人工产生的黑暗环境中可以检测小鼠固有的生物钟节律。在更加复杂的检测中,可以在给予一定光刺激的条件下,逐渐改变小鼠的光周期,考量其对外界光周期的适应能力。
将每只小鼠单独放在配有跑轮装置的检测笼中适应 1 周以上的时间,给予正常的水和饲料,及 12:12 的光周期节律,然后换成完全黑暗的环境,连续检测小鼠的活动、静息情况。
在有光刺激条件的检测中,通过适当的光牵引,可以检测更多的生物节律指标,如时相转换反应等。
材料与仪器
器材:
ClockLab 动物行为监测系统(Actimetrics 公司),配有转轮的小鼠饲养笼(转轮直径 12 cm),配有独立光源及换气设备的小鼠饲养箱,电源定时转换器。
步骤
监测昼夜节律实验的基本过程可分为如下几步:
A 准备 2~4 月龄的实验组与对照组小鼠各不少于 4 只(性别对该检测的影响并不大),分别放入相应数量的配有转轮的小鼠饲养笼中独立喂养,加满水与饲料。
B【光牵引与环境适应】
①设定给光程序为每天早上 8:00 开灯,晚 20:00 关灯。用 ClockLab 持续记录小鼠活动情况 1 周。注意观察小鼠的活动记录在 1 周后是否达到稳定、规律。
②小鼠经光牵引 1 周,活动记录稳定后,调整给光程序为从当晚 20:00 起持续黑暗,在全暗状态下记录小鼠行为 10 天,至多 3 周(不换笼)。
③在 ClockLab 中作出如图 8-7-7 所示的小鼠活动图(actogram),初步观察小鼠昼夜节律的周期。
注意事项
1 小鼠的昼夜节律行为易受外界因素影响,且对光照敏感,实验过程中应最大限度地降低人为因素的干扰,保证测量结果的可靠性。进行实验的动物房,除满足正常的饲养条件外,还应保证避光与隔音效果良好,不常有人走动。
来源:丁香实验