用试剂盒抽质粒跑不出条带的原因分析

DXY网友yfq1232000问：

今天做了一个小抽，但跑电泳时却没有条带，我抽过多次质粒，应该不会抽不出来，我考虑是不是菌液里没有我要的菌，是杂菌，但是我的LB里放了amp+，如果有杂菌的话那么也抗amp+，而一般的抗性基因都位于质粒上，而试剂盒又不仅仅是只能抽DH-5a的质粒，那么也是应该可以抽出杂菌的质粒，这样的话也是应该有条带的啊？这是为什么？

DXY网友heartips回复：

1、小抽你用的是试剂盒还是自已配的试剂？溶液2要现用现配，保存一般不能超过1个月。

2、操作要小心，特别是乙醇沉淀后，一不小心沉淀就会被吸走。

3、细菌量要够，浓度也要大。

4、电泳marker是不是跑出来了，确定电泳没有问题。我好几次是因为EB不好看不到条带。

DXY网友iceangletree回复：杂菌污染也会导致质粒提取质量和产量均减低，在这样的情况下只有把保存的菌划板，挑单克隆，重新摇菌来抽提。

楼主回复：好像因为沉淀吸出来了一点，又重新抽了，抽出来了。

DXY网友nancy5476问：我抽质粒的时候用的是试剂盒，经常会有杂蛋白被我抽出，该怎么处理这个问题啊？

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