果蝇的单因子杂交
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果蝇的单因子杂交
一、实验目的：
通过实验深刻理解孟德尔分离定律；学习遗传学实验结果记录及统计处理方法。
二、实验材料：
野生型：长翅（+ / +） 突变型：残翅（vg / vg）
三、实验原理：
果蝇长翅座位是Ⅱ67.0，长翅对残翅完全显性。残翅果蝇的双翅几乎没有，只有少量残痕，不能飞翔。
正交： P： 长翅（♀）×残翅（♂） 反交：残翅（♀）×长翅（♂）
（+/+） （vg / vg） （vg / vg） （+/+）
↓ ↓
F1： 长翅 长翅
（+/ vg） （+/ vg）
↓ ↓
F2： 长翅 残翅 长翅 残翅
（+/+ +/vg） （vg / vg） （+/+ +/vg） （vg / vg）
1 ： 2 ： 1 1 ： 2 ： 1
一对杂合状态的等位基因，在遗传上保持相对的独立性，在配子形成时按原样分离到不同的配子中去，配子分离比为1：1，其自交后代中基因型分离比为1：2：1，表型分离比为3：1。
四、实验内容：
1、 选处女蝇：将旧瓶中的果蝇麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇，每组做正交、反交各1瓶，每瓶中5对果蝇，确保杂交瓶中各只果蝇麻醉苏醒，没有死蝇。贴好标签，于25℃培养；
2、 7d后，处死杂交亲本；
3、 再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型；
4、 选取正、反交各5对F1果蝇，分别转入一新 培养瓶 ，于25℃培养，其余F1代果蝇处死；
5、 7d后，处死F1亲本；
6、 再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d；
五、备注：
1、由于雌蝇生殖器官中有贮精囊，一次交配可保留大量精子，供多次排卵受精用，因此做杂交实验前必须收集未交配过的处女蝇。由于孵化出的幼蝇在12h内（更可靠是8h内）不交尾，因此必须在这段时间内把雌、雄果蝇分开培养，所得的雌蝇即为处女蝇。
2、x 2 测验用来表示实得数与理论数的差异，又被称为卡平方。所得结果当P<0.05时，认为实得数据与理论比数间有显著差异，应把假设的分离比否定；当P<0.01时，认为实得数据与理论比数间有极显著差异，更有把握把假设的分离比否定掉。
3、n表示自由度，表示在各项预期值决定后，实得数中有几项能自由变动。在分离比数的适合度测验中，自由度一般等于子代分类数减一。如果蝇两个实得数据残翅和长翅中，一旦长翅数目被固定下来，则残翅数目就不能自由变动，因为子代总数目是一定的。所以它的自由度是1。
果蝇的单因子杂交实验
F1：
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观察结果 统计日期 |
长翅（♀）×残翅（♂） |
残翅（♀）×长翅（♂） |
||
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长翅数 |
残翅数 |
长翅数 |
残翅数 |
|
|
|
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|
|
F2：
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观察结果 统计日期 |
长翅（♀）×残翅（♂） |
残翅（♀）×长翅（♂） |
||
|
长翅数 |
残翅数 |
长翅数 |
残翅数 |
|
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合 计 |
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对F2代的统计结果做x 2 测验：
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野生型（正、反交合并） |
突变型（正、反交合并） |
总计 |
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实际观察数（O） |
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预期数（E） |
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偏差（O-E） |
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(O-E) 2 /E |
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查x 2 表，进行差异显著水平检验
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P n |
0.99 |
0.95 |
0.50 |
0.10 |
0.05 |
0.02 |
0.01 |
|
1 |
0.00016 |
0.0039 |
0.15 |
2.71 |
3.84 |
5.41 |
6.64 |
|
2 |
0.0201 |
0.103 |
1.39 |
4.61 |
5.99 |
7.82 |
9.21 |
|
3 |
0.115 |
0.352 |
2.37 |
6.25 |
7.82 |
9.84 |
11.35 |
|
4 |
0.297 |
0.711 |
3.36 |
7.78 |
9.49 |
11.67 |
13.28 |
|
5 |
0.554 |
1.145 |
4.35 |
9.24 |
11.07 |
13.39 |
15.09 |
|
10 |
2.558 |
3.940 |
9.34 |
15.99 |
18.31 |
21.16 |
23.21 |
