VPN会哦路
请问下,在验证转录因子与启动子的互作的时候,用酵母单杂交证明了有互作,这时候可以说明转录因子对这个靶基因是有激活作用吗?还是酵母单杂交只能证明互作关系,激活还是抑制不能证明呢?
毛利小五郎的徒弟
激活或者抑制需要做酵母通路调节实验验证,这个实验无法说明
sswei
酵母单杂交:是研究DNA与蛋白质之间的关系,将编码待测蛋白和AD的融合载体导入细胞,如果靶蛋白与顺势作用元件结合,那么报告基因表达。诱饵是启动子,想找上游调控蛋白,猎物是蛋白,将编码待测蛋白和AD的融合载体导入细胞,如果靶蛋白与诱饵结合,那么报告基因表达。
loveliufudan
酵母单杂交实验可以证明两个蛋白质之间的互作关系,但不能证明转录因子对靶基因的激活或抑制作用。因为在酵母中的基因表达可能与真核生物中不同,即使在酵母中表现出的互作关系,也不能保证在真核生物中表现出相同的作用方式。因此,验证转录因子对靶基因的激活或抑制作用需要在真核生物细胞中进行进一步的实验,例如免疫印迹、荧光素酶报告基因等技术。
dxyc42u
只能证明有互作关系,还不能证明是抑制还是激活
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