旅行者为疟疾研究提供了新的分离物

过去10年，英国每年报告1300多例输入性疟疾病例。其中一些不幸的旅行者最近提供了血样，这些血样可能对今后研究疟原虫恶性疟原虫生物学的许多方面产生长期的有益影响。这是因为Colin Sutherland和他的团队，总部设在伦敦热带医学与卫生学院，已经从这些样本中建立了7个新分离株的连续培养，这些分离株都来自非洲。

2010年估计66万人死于疟疾，其中大部分是由于恶性疟原虫感染，尤其是生活在撒哈拉以南非洲的婴儿。令人惊讶的是，这个数字却是个好消息，因为它代表了自2000年以来非洲死亡率下降了33%。然而，疟疾控制的历史是乐观的历史，随后是挫折，人们担心，使用驱虫蚊帐取得的进展，以及使用联合药物治疗取得的治疗成功，可能是短暂的。

青蒿素衍生物和长效药物的结合目前是世卫组织推荐的治疗恶性疟的一线药物；但据报道，对青蒿素的耐药性正在蔓延。药物失效表现为一种延迟清除表型，寄生虫的环期仍处于休眠状态。这导致了一些关于抗药性一词的争论，正如在本文1-3中所使用的，但是不管所使用的术语是什么，迫切需要对这种新的表型有更深入的了解。

体外培养恶性疟原虫的能力促进了我们对恶性疟原虫红细胞阶段生物学的许多知识，包括抗药性的调查。目前常用的培养体系是以Trager和Jensen于19764年报道的培养体系为基础的，目前世界上大多数实验室培育的无性系都是在1980年代建立的，经过几十年的实验室改造。因此，它们在揭示当前问题（如确定青蒿素衍生物抗药性的标记）方面的作用可能有限。此外，尽管大多数疟疾临床病例发生在非洲大陆，但这些培养物中的大多数要么来自来源于亚洲的分离物，要么是在荷兰分离的两个广泛使用的克隆物（NF 54和一个衍生物，3D7）之一，其地理来源不明。相比之下，萨瑟兰的新文化起源于西非或东非。最后，对于那些对性阶段或蚊子感染感兴趣的人来说，目前使用的许多克隆体并不是感染性配子体的可靠生产者。

从新收集的分离物中建立适合恶性疟原虫培养的克隆是一项挑战，因此萨瑟兰团队的成功值得称赞。这一成就可能归因于他们决定在第一个分离物培养后改变生长培养基。七个分离株中有六个适合于使用一种培养基进行培养，在这种培养基中，人血清的百分比降低，并且按照目前的建议，完整的培养基中添加血清代用品Albumax II。

那些研究疟疾性阶段的研究人员特别感兴趣的是，当寄生虫血症增加到2%以上时，一个分离物很容易产生配子体。

所有七种稳定剂都可以作为开放资源在欧洲疟疾试剂库中获得。

本文报告了7位捐赠者的医疗和旅行史。考虑到大多数患者在流行区度过的短暂时间，有趣的是注意到所有分离株都是多克隆的。巢式PCR分析结果表明，除1个分离物外，其余均由4～6个克隆组成。作者指出，多克隆性（一个个体内存在多个克隆）可能是由一次接种传染性（子孢子）阶段引起的，因为蚊子可能感染多个不同的克隆。这强调了非洲分离株的复杂性，如果其中一个克隆具有不同的生长模式或是耐药，可能会使治疗方案复杂化。

培养物被用来筛选对各种药物的反应。报告了对一组抗疟疾药物的敏感性，以及耐药标记的单倍型。其中5例对氯喹敏感，用鲁美芬亭（与蒿甲醚联合用于患者治疗）激发时，记录到不同的反应。以清除延迟表型为代表的青蒿素抗性在非洲尚未报道，所有分离株均对二氢偶氮二氢和ozz77内过氧化物敏感。

希望这些新建立的分离株将证明对疟疾社区有价值，本报告将为在培养中建立更多的分离株铺平道路。