🔥 新物体识别

新物体识别通过根据动物对熟悉的旧物体和新物体的探索时间长短来评估被测试动物的记忆能力，这是一种简单的判断实验小、大鼠记忆能力的实验方法。

在一个旷场箱内放几个物体，让小鼠熟悉一段时间后，将其中一个物体换成一个新物体。观察实验鼠是否对新物体更感兴趣。若否，则认为实验鼠有记忆缺失的可能。

新物体识别测试被广泛应用于对认知功能障碍和其防护措施等方面的研究，包括亨廷顿病、阿尔茨海默症和精神分裂等疾病。

实验鼠；实验旷场箱为 25cm×25cm×40cm 无顶箱子；

8cm 高，3.2cm 宽的乐高积木两个；

装满沙子的底面积为 25cm² 细胞培养瓶两个；

TM-Vision 行为学实验系统

购买的小鼠先放在饲养笼中适应 5～7 天。在进行训练和测试前三天，每天抚摸实验小鼠 1min，避免刺激大。

Day 1 适应阶段

在进行训练或测试前 24h，将小鼠放在测试的房间内，适应测试环境。

小鼠被放置在旷场箱中进行环境适应，头朝向实验者这一面，让其自由探索 5min。实验结束后取出小鼠放回原来的笼子，用 75% 酒精清洁空箱，去除残留的气味，等待或加速酒精挥发后进行下一只小鼠的适应。

Day 2 训练阶段

将两个相同的物体（乐高积木或装有沙子的细胞培养瓶）固定在距两箱壁各 5cm 处。

随后将小鼠放入空箱中，头朝两个相同物体相反的方向，让其在箱中自由运动。

放入后立即开启录像设备，实验者立即离开测试房间，记录小鼠与这两个物体接触的情况，包括鼻子或嘴巴触及物体的次数和距离物体小于 2cm 范围内探究的时间。

如果总探索时间达 20s 或者实验时间达到 10min，停止实验并记录此过程花费的时间。实验结束后取出小鼠，立即将小鼠放回原来饲养的鼠笼内。待小鼠休息 1h 后再进行测试（此期间小鼠仍呆在测试房间内）。

也可在 24h 后再进行测试，可根据实验需要自行调整。用 75% 酒精清洁空箱和物体，去除残留的气味，干燥后进行下一只小鼠的实验。

Day 3 测试阶段

每只小鼠标准时间小于 10 min，24h 后，与训练阶段相似，将相同物体的一个换成另一个物体。

新物体的位置（左或右）在不同小鼠和不同测试组中随机。计时小鼠分别在两个物体上的探索时间和探索次数，如果总探索时间达到 20s 或者实验时间达到 10min 需停止实验并记录此过程花费的时间。

测试阶段小鼠行为被跟踪记录，并据此单独分析每只小鼠探索新物体的时间T1与探索旧物体的时间 T2，计算得到认知指数 CI。认知指数计算公式为CI=T1/(T1+T2)。

也可计算小鼠的认知指数(Recognition index，RI)。RI(％)=新物体探索次数/（新物体探索次数+旧物体探索次数）×100%。认知指数越高表示小鼠记忆能力越强。

• 实验结束后取出小鼠，用 75% 酒精清洁空箱和物体，去除残留的气味，干燥后进行下一只小鼠的实验。
• 在小鼠嗅探物体或在观察物体同时欲触摸物体时（当鼻子与物体之间的距离小于 2 cm时）对物体探测进行计时。
• 前爪搭在物体上、鼻子嗅物体、舔物体等均属探测物体。
• 咬物体、摆个架势或爬到物体上不动不能算是对新物体的探测，这不符合探索条件不计入探索时间。

不同箱子背景对 NOR 测试结果有不同影响，动物在黑色环境中受到的压力刺激小，可以对物体保持较高的专注，从而也会对物体保持更大的兴趣。

因此，在开展新物体识别测试的时候，尽量要保持实验室环境的昏暗，不要强光刺激，相对昏暗的环境中小鼠对新事物的识别能力明显提高。