MOI 值摸索方法

MOI：即 multiplicity of infection，也叫感染复数。

1. 很多细胞可以通过文献查阅获取病毒感染的 moi 值。
2. 针对无法查询到 MOI 值的细胞可以按照以下步骤进行摸索。

细胞准备：目的细胞接种至 96 孔板，按细胞的生长速度来确定接种量，一般情况以 72h 长满单层为标准。

1、设置 moi 梯度：

设置 moi=3、10、30、100 等不同梯度，根据细胞数量和病毒滴度计算所需病毒原液体积。

病毒体积计算公式：

病毒体积（μL）=MOI *细胞数/病毒滴度（TU/mL）×1000

96 孔板每孔不同 MOI 值加入病毒液体积

2、病毒感染（1/2 体积感染法）：

1/2 小体积感染法，即病毒感染时，加入 1/2 体积新鲜培养液，加入慢病毒感染 4h 后补足至培养体积，24h 后更换新鲜培养液继续 37℃ 培养。

3.、观察荧光：

感染 48h 后显微镜初步观察荧光。感染 72h 后，感染效率在 80% 左右，且细胞生长状态良好的组，对应的感染条件和 MOI 即可作为后续感染实验的依据。

1. 如果病毒不表达荧光，还可以通过目的基因的 qPCR、WB、免疫荧光、免疫组化等方法摸索最佳 MOI。
2. 不同实验室由于细胞的来源、代数和细胞状态等因素的影响，MOI 值也略有差异，文献中查得的 MOI 值最好先进行验证再使用。

腺病毒感染细胞 MOI 值摸索方法可以参考慢病毒，大部分细胞 MOI 在 100-500 之间，较少有 100 以内的情况，腺病毒对细胞毒性比较小，所以 MOI 大一点没啥影响。