简介
全血免疫荧光染色法，是指在检测血液样品时，血液样品不同于细胞，一般需要对全血进行裂解红细胞处理。标记方法常使用直接标记染色法。
原理
全血免疫荧光染色法的基本原理是实验中经常检测血液样品，血液样品不同于细胞，一般需要对全血进行裂解红细胞处理。标记方法常使用直接标记染色法。
材料与仪器
器材：
流式细胞仪 (本实验室为 BD Aria)
试剂：
① 荧光标记的特异性单克隆抗体及同型对照抗体；
② 细胞洗液。含 2% BSA，0.2% NaN3 的 PBS, 固定液 (1% 多聚甲醛 PBS，pH7.2) ；
③ 红细胞裂解液。NH4C1 4.16 g，KHCO3 0.5 g，EDTA 0.02 g，溶于 100 ml 水中，调 pH 至 7.2，补水至 500 ml，4Y 保存。使用时恢 复至室温。或者购买商品化的红细胞裂解液，使用方法根据试剂 的说明书。
步骤
全血免疫荧光染色法的基本过程可分为如下几步：
(1) 取两只流式管分别标记为同型对照管和样品管，每管中加入 100 μl 全血样品。在同型对照管中加入荧光素标记同型对照抗体作为同型对照管。在样品管中加入荧光标记的特异性单克隆抗体作为样品管，混匀 (试剂的用量根据试剂说明书)。
注意：
①在样品管中加入全血时，枪头要到达试管的底部，不要把血溅到管壁，避免红细胞裂解不彻底。
②全血样品一般要求在 6 h 内检测。
(2)4 ℃ 避光孵育 30 min，加入红细胞裂解液 2 ml，室温避光 10 min，1000 r/min 离心 5 min，反复洗涤 2 次。
(3) 弃上清，加入固定液 0.5 ml，混匀。
(4) 上流式细胞仪检测。
来源：丁香实验
