简介
牙髓坏死及根尖周病的患牙需要作根管治疗。根管治疗术是通过清除根管内的坏死物质，进行适当的消毒，充填根管，以去除根管内容物对根尖周围组织的不良刺激，防止发生根尖周病变或促进根尖周病变愈合的一种治疗方法。根管内应用试验操作过程基本同根管治疗术，其目的在于评价根尖区牙髓组织及根尖周组织对用于根管内的材料的生物学反应。
材料与仪器
器材：
牙科高速窝轮钻机、载玻片、牙科调拌刀、酒精棉球、系列根管锉、拔髓针、根管探针、组织处理试剂及设备、橡皮障。
试剂：
① H2O2
② 戊巴比妥钠
③ 洗必泰
④ 生理盐水
⑤ 齿科氧化锌丁香酚
步骤
根管内应用试验的基本过程可分为如下几步：
（一）牙齿制备
A 用合适的麻醉剂对动物实行全身麻醉。去除牙面结石及菌斑。用浓度为 30%（v/v）的过氧化氢之后，用碘伏清洁牙面术区并干燥。上橡皮障。
B 无菌条件下用高速钻开髓，注意用连续的无菌生理盐水冲洗开髓孔，防止高温对牙组织的损害。用生理盐水清洗暴露的牙髓，并用消毒棉球擦干。确定试验工作长度，用新的无菌拔髓针按此长度拔除牙髓。用洗必泰清洗根管。
C 用无菌根管锉按试验工作长度扩大根管，使根管内空间达到 35～40 号根管锉粗细的程度。清除根管内牙本质碎屑，以防其堵塞根尖而妨碍根管内材料与根尖周组织接触。机械预备完成后，用洗必泰清洗液将根管冲洗干净，并用无菌棉球及大而钝的无菌纸捻擦干根管。
每一试验周期用试验材料充填至少 10 颗牙齿，阴性对照材料充填至少 5 颗牙齿。试验与对照牙齿随机分布。按试验工作长度将试验材料或对照材料充填入根管。用硬氧化锌丁香酚水门汀封闭根管口及充填牙齿窝洞，6 个月组加用银汞合金充填牙齿窝洞。
（二）术后观察
A 在观察期内观察动物的变化，如饮食习惯及术区是否有炎症反应等。（28 ± 3）天及 6 个月后，用过量麻醉剂处死动物。检查充填体、牙齿及其支持组织，记录异常表现。
B 取下包含牙齿及其周围软硬组织的组织块，用中性甲醛缓冲液固定。如在处死前加用血管内灌注法固定，可获得更好的固定效果。
C 固定后，对组织块拍摄 X 线片，观察根尖区组织有无改变。用合适脱钙剂脱钙 ［如 10%（v/v）甲酸或 pH 为 7.4 的 0.5 mol/L 乙二胺四乙酸（EDTA）或 5%（v/v）硝酸］，石蜡包埋，连续切片。切片厚度为 5～10 μm，沿牙齿长轴经根管及其分叉处切片。用 HE 染色，观察材料与牙髓界面及根尖周组织状况。记录牙齿根尖区牙髓、根尖周组织、牙本质和牙骨质的全部组织学变化（图 10-5-40）。
注意事项
可从非啮齿类动物猴、犬、小型猪中任选一种。每种至少 4 只动物，每个周期至少 2 只动物，所用牙齿应是完整的恒牙，最好是切牙、尖牙及（或）前磨牙，根尖完全形成。试验周期为（28 ± 3）天及 6 个月。选择足够的动物，以便每个试验周期至少有 10 颗牙含试验材料，5 颗牙含阴性对照材料。
来源：丁香实验
