简介
盖髓试验其目的在于观察盖髓材料与牙髓接触后所产生的生物学反应，根据生物学反应的程度，评价盖髓材料的生物相容性。材料在临床应用中所需的操作过程亦包含在此评价中。盖髓术（pulp capping）是使用药物覆盖于近髓的牙本质上或露髓的牙髓创面上，使牙髓病变恢复以保存生活牙髓的治疗方法。目前常用的盖髓剂首选氢氧化钙类制剂。
材料与仪器
器材：
高速窝轮钻机、牙科钻、载玻片、牙科调拌刀、酒精棉球、组织处理试剂及设备、橡皮障。
试剂：
① H2O2
② 戊巴比妥钠
③ 生理盐水
步骤
盖髓试验的基本过程可分为如下几步：
（一）试验步骤
A 将实验动物在手术台上固定，用碘伏、75% 乙醇溶液清洗、消毒动物口周进行备牙操作。清除牙面所有的牙石及菌斑。用 3%H2O2 清洗牙冠、牙龈和软组织。放置橡皮障以隔离所用牙齿。再用 0.1% 洗必泰消毒牙面和手术区。
B 备洞。在牙齿颊面或唇面牙颈部下方牙釉质部位，用涡轮机在水喷雾条件下用倒锥钻低速制备 V 类洞，深至牙本质，再用 2 号球钻扩大钻孔至牙本质窝洞底部显粉红色或钻穿牙本质，勿损伤牙髓。用灭菌生理盐水冲洗窝洞使窝洞中央底部出现孔径大约 1 mm 的小孔，用生理盐水冲洗窝洞至出血停止。用其他冲洗剂或试剂进行止血。无菌棉球擦干洞壁。
C 按随机原则放置试样，每一试验周期用试验材料盖髓至少 7 个窝洞，对照材料盖髓至少 5 个窝洞。在消毒调和板上调和受试材料和对照材料，用调拌刀挑取适量的试验样品糊剂与氢氧化钙糊剂分别放置于窝洞内露髓孔上。再用调拌刀挑取适量的氧化锌丁香酚水门汀覆盖试验与对照材料。最后挑取少量的牙釉质黏合剂覆盖，75% 乙醇棉球修饰表面。
D 试验组共制备 7～8 颗牙，对照组制备 5～6 颗牙。
E 大体观察。观察动物的一般状态，体重变化，进食情况，特别是术后 3～5 天。观察并记录进食、口腔组织红、肿、流涎或肿胀、化脓等改变。
F 切片制备。于手术后 7 天和（70 ± 5）天，分别无痛处死实验动物。切去其上、下颌骨和牙齿，除去皮肤，仔细观察充填物、牙和其周围组织，置 20% 甲醛溶液内固定 1 周。切取所需要的每一包含牙齿及其周围软硬支持组织的组织块及部分颌骨（包括牙根尖组织），进行 X 线检查影像改变。将试验牙与对照牙分别置有机酸和无机酸脱钙液 ［如 10%（v/v）甲酸或 pH7.4 的 0.5 mol/L 乙二胺四乙酸（EDTA）溶液］ 内脱钙。以梯度酒精脱水，石蜡包埋。切片沿牙纵轴并通过露髓孔作组织切片，厚度 5～10 μm。HE 染色。
（二）观察指标
A 检查切片，描述组织学特点。盲法检查切片。对每一连续切片，详细描述并记录牙本质、牙髓及根尖周组织的全部组织学特点（炎症浸润的程度和范围、炎症细胞类型、成牙本质细胞的改变、充血、牙髓变性、牙髓坏死的性质及范围、牙本质桥形成等），包括任何可能由窝洞制备所引起的组织学变化。按下列分级方法并分别对牙髓表层组织（成牙本质细胞层、无细胞层及多细胞层）及深部牙髓组织的炎症浸润程度进行分级。组织病理学观察的数目为试验组 7 个组织块，对照组 5 个组织块。
B 根据炎症反应程度进行分级。无炎症，0 分；轻度炎症，1 分；中度炎症，2 分；重度炎症，3 分；脓肿形成或扩散至根尖周组织区，4 分。计算炎症反应指数：炎症反应指数 ＝ 各切片计分之和/观察切片数之和。
C 必要时记录每一试验周期含细菌的窝洞数目。
注意事项
选用健康成年家犬 2 只，体重 15～25 kg，每一试验时期 1 只。试验前检查实验动物已有完整恒牙，根尖已完全形成。试验前使动物适应环境 7 天。动物麻醉采用 3% 戊巴比妥钠腹腔注射麻醉动物，剂量为 30 mg/kg。盖髓试验周期为（7 ± 2）天及（70 ± 5）天。
来源：丁香实验
