简介
口腔黏膜刺激试验的目的是通过试验材料或浸提液接触金黄地鼠口腔黏膜以评价试验样品对金黄地鼠口腔黏膜的刺激性。金黄地鼠用于评价生物材料或材料浸提液已有很长的历史。国际标准和国家标准均建议采用金黄地鼠颊黏膜贴敷试验材料或材料浸提液评价医用材料。
材料与仪器
器材:
30 ml 广口瓶 3 个、手术剪、镊子 3 把、缝针、小号缝线、电子天平、酒精棉球、一次性橡胶手套、烘箱、立式压力蒸汽灭菌器、生物学显微镜、组织处理试剂、切片装置。
试剂:
① 戊巴比妥钠
② 生理盐水
步骤
口腔黏膜刺激试验的基本过程可分为如下几步:
A 使用 3~4 mm 的合适项圈,使动物能维持正常进食和呼吸,且又能防止动物口腔内棉球移出。试验期每天称重,连续 7 天。在此期间,检查每只动物的体重下降情况,必要时可调整项圈。除掉动物项圈,翻转颊囊用生理盐水冲洗后,检查有无异常。
B 对于固体试验材料,可将样品(直径不大于 5 mm)放入颊囊内。液体试验材料或浸提液样品则可用棉球浸透试验材料或浸提液,记录所用的体积,放入动物的一侧颊囊内。也可将适宜体积的样品直接灌注入颊囊。另一侧颊囊不放样品作为对照。
C 必要时重新给动物带上项圈放回笼中。接触时间应尽可能与材料实际使用时间一致,但最少不能少于 5 分钟。接触后除去项圈和棉球,用生理盐水冲洗颊囊,应注意不要污染另一侧颊囊。对于急性接触,重复上述步骤每小时 1 次,共 4 小时。
D 多次接触试验时,应根据预期临床应用情况确定试验用量、接触次数、时间和间隔期。取出试验材料后肉眼观察颊囊,并且在每次接触前(如需多次接触时)检查颊囊。如动物体重持续下降,应将其从试验中淘汰。
E 初试应至少使用 3 只动物评价试验材料。初试反应若疑似或不明确,应考虑进行复试。除掉动物项圈,翻转颊囊用生理盐水冲洗后,检查有无异常。
注意事项
使用同一品系的金黄地鼠 3 只,体重 60~90 g,对动物性别无特殊要求,对实验动物年龄也无特殊要求,适应环境最少 7 天。金黄地鼠门齿终生生长,口腔两侧各有一个很深的颊囊,深度 3.5~4.5 cm,直径 2~3 cm,主要功能是储备食物与搬运筑巢材料。因为其口腔具有的颊囊,因此金黄地鼠被选作口腔材料刺激的实验动物。
来源:丁香实验