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石蜡包埋切片

相关实验:小鼠常规病理分析实验

别名:pathological diagnosis

最新修订时间:

简介

使用程序脱水包埋机(如 Leica ASP200S)可大量节省时间和操作过程中产生的不确定性,绝大多数组织只要大小修剪合适,经过常规设定程序的包埋都可以达到理想的脱水透蜡效果,对组织大小和完整性有特殊要求的,则推荐采用大量延长梯度脱水透明时间的手工脱水包埋来取得预期的透蜡效果。

材料与仪器

器材:程序脱水包埋机、石蜡切片机、分离组织

试剂:中性甲醛

步骤

石蜡包埋切片的基本过程可分为如下几步,以 Leica ASP200S 程序脱水包埋机为例:

(一)过夜脱水透蜡


中性甲醛中等待至合适的时间,倒推全部程序在第二天 9:30 结束。



(二)包埋


常规组织修剪方式及包埋方向示意如图 8-2-3 所示。


(三)切片


一般石蜡切片的厚度在 3~7 μm 为宜,冷冻受到客观条件限制,一般 6~10 μm,以单个细胞的直径为参考。用于做特殊染色的可以适当增加厚度以保证结果的阳性明显。较薄的切片更适于清楚地观察结构,但也可能影响组化或荧光的信号强度。

注意事项

小鼠组织的体积较小这一特性对组织包埋的位置、方向等提出了较高的要求,常规取得的组织在修组织及包埋时都应达到组织原始位置确定、不同小鼠相同组织包埋时位置方向一致的要求,因此从修组织开始,操作人员即应对实验过程进行完整的记录,以确保了解每一个包埋后蜡块中组织的内容、位置和方向,以达到最终切片的一致,便于染色后的观察分析。

来源:丁香实验

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