简介
灌流可以去除组织(尤其是脑组织)中血液对包埋切片的影响,保证大部分组织形态完好,而如果需要取组织提蛋白或提 RNA,则不能使用固定液,可选择生理盐水进行灌流或不灌流。
材料与仪器
器材:灌流仪、解剖工具、静脉注射针、小鼠
试剂:生理盐水
步骤
灌流的基本过程可分为如下几步,以灌流仪为例:
A. 将充分麻醉的小鼠固定在铺有足量吸水纸的解剖台上,掀起胸部的皮肤,垂直剪开胸骨,打开胸腔,避免剪断左颈总动脉。
B. 剪开右心耳,有深色血液流出即可,使用灌流仪(图 8-2-1)连接的静脉注射针插入左心室位置,打开灌流机保持 3 ml/min 左右的流速,在 37 ℃ 下用生理盐水灌流约 1 分钟
C. 停机并在室温下改用固定液灌流约 2 分钟,小鼠尾尖左右摆动数次表示灌流完成,停止灌流,排出多余固定液并保持针尖通畅。
注意事项
需要进行称重比较的组织则不能灌流,以免过量液体灌注影响组织真实重量。
来源:丁香实验