简介
C显带技术是使结构异染色质或高度重复的 DNA 着色,这种显带方法对染色体着丝粒区和 Y 染色体长臂异染色质区的观察十分有利。
原理
C显带技术法的基本原理是是使结构异染色质或高度重复的 DNA 着色。
材料与仪器
器材:
① 染色缸
② 恒温水浴箱
③ 显微镜
④ 烘箱
⑤电吹风
⑥人中期染色体玻片标本。
试剂:
① 0.25% 胰蛋白酶溶液
② 0.85% 生理盐水
③ 吉姆萨工作液
④ 1 mol/L NaH2PO4 缓冲液(pH4.0~4.5)
⑤ 0.2 mol/L HCl
⑥ 1% 的 Ba(OH)2
⑦ 2 x SSC 溶液
⑧ 0.4% 酚红
步骤
C显带技术法的基本过程可分为如下几步:
A 常规制片后,将染色体玻片标本浸入 0.2 mol/L HCI 溶液中,室温放置 1 h。
B 用蒸馏水冲洗染色体玻片标本。
C 将染色体玻片标本浸入 50 ℃ 预热的 1% Ba(OH)2 溶液中,处理 15~20 s。
D 用蒸馏水冲洗染色体玻片标本。
E 将染色体玻片标本浸入 2 x SSC 溶液中,60 ℃ 处理 90 min。
F 用蒸馏水冲洗染色体玻片标本后,用吉姆萨工作液染色 20~30 min。
G 流水轻轻冲洗玻片背面,将多余的吉姆萨染液冲掉。
H 空气干燥。
I 先用低倍镜浏览整张染色体玻片标本,再用油镜观察并识别染色体的着丝粒(或 Y 染色体长臂的异染色质区)。
来源:丁香实验