G显带技术法

G显带技术是指将染色体玻片标本经过胰蛋白酶处理后，再用吉姆萨进行染色，使每条染色体沿其长轴显示出一定数量的、宽窄和深浅不同的横纹，即带型。由于人类 22 种常染色体和 X、Y 染色体的带型都各具特征，根据带型可清楚地分辨出每条染色体。

G显带技术法的基本原理是将染色体玻片标本经过胰蛋白酶处理后，再用吉姆萨进行染色，使每条染色体沿其长轴显示出一定数量的、宽窄和深浅不同的横纹，即带型。

器材：

① 染色缸

② 恒温水浴箱

③ 显微镜

④ 烘箱

⑤ 电吹风

⑥ 人中期染色体玻片标本。

试剂：

② 0.85％ 生理盐水

③ 吉姆萨工作液

④ 1 mol/L NaH₂PO₄ 缓冲液（pH4.0～4.5）

⑤ 0.2 mol/L HCl

⑥ 1％ 的 Ba（OH）₂

⑦ 2 x SSC 溶液

⑧ 0.4％ 酚红

G显带技术法的基本过程可分为如下几步：

A 常规制片后，一般将标本（未染色的白片）置于 37 ℃ 培养箱中老化 3～7 d 再进行显带；若急用，则置 60 ℃ 烘烤 8～10 h 或 75 ℃ 烘烤 2 h，然后置 37 ℃ 温箱备用。

B 取 0.25％ 胰蛋白酶溶液 5 mL，倒入染色缸中，加入 45 mL 0.85％ 生理盐水，滴入 0.4％ 酚红，然后用 1 mol/L HCl、1 mol/L NaOH 调节胰蛋白酶溶液成肉汤色（pH6.8～7.2），置 37 ℃ 水浴箱中预温。

C 将染色体玻片标本放入胰蛋白酶溶液中处理 4～5 min，多次摇动玻片，使胰蛋白酶作用均匀。

D 取出染色体玻片标本，用 0.85％ 生理盐水漂洗 2 次，去掉胰蛋白酶溶液。

E 将玻片标本放入吉姆萨工作液中染色 5～10 min。

F 流水轻轻冲洗玻片背面，将多余的吉姆萨染液冲掉。

G 空气干燥。

1 高温烘烤法老化的标本对胰蛋白酶的抵抗性比室温气干法老化的标本要强，应注意胰蛋白酶的处理时间。

2 要有分散良好的标本，并且标本保存的时间最好不要超过 1 周（保存时间越长，细胞对胰蛋白酶的抵抗性越大，片龄超过 20 d 以上的标本往往导致染色体呈斑点状，而不是带纹）。