细胞培养基成分

最新修订时间：2024-05-13

材料与仪器

步骤

2 . 2 . 1 人胚胎干细胞（hES) 培养基 BRL-条件培养基（见 2. 2. 5 节） ..................................... 60ml BRLM/20F B (l 2.2.4f ) ......................................... 40ml LIF (ESGRO )， IX IO6U/袋............................. 100M1, 1000U/ml 2. 2. 2 人胚胎干细胞玻璃化冻存和解冻的培养基 2. 2. 2. I h E& H E PE S 培养基含有 GIutamax的 DMEM，不含丙酮酸钠................................ 16mI ESFBS [ E S 级别胎牛血清 ] .............................................4ml H EPES, lmol/L .................................................... 0.5ml 2.2. 2.2 0.2mol/L 虞糖溶液鹿糖， lmol/L ........................................................ Iml hES-HEPES ............................................................. 2- 2. 2_ 3 0•lm ol/L 篇糖溶液鹿糖， lmol/L ...................................................... 0. 5ml hES-HEPES 培养基............................................... .. 2.2. 2 _ 4 玻璃化培养基， 10% hES-HEPES 培养基...................................................... 乙二醇 ............................................................ 0. 25ml DMSO ............................................................ 0. 25ml 2.2.2.5 玻璃化培养基， 2〇 % hES-HEPES 培养基 ................................................. 75ml 蔗糖溶液， lmol/L ................................................ 0.75ml 乙二醇 ..............................................................0.5ml

DMSO ............................................................ 0.5ml 2.2.3 小鼠胚胎饲养细胞培养基（M EFM ) 含有 Glutamax的 DMEM, 不含有丙酮酸钠 .......................... 230ml FBS ........................................................ 25ml (10%) 非必需氨基酸， IOOX ............................................... 2.5ml 2-巯基乙醇， 50mmol/L ............................... 0. 5ml (0. lmmol/L ) I，谷氨酰胺， 200mmol/L ................................. 2. 5ml (2mmol/L ) 2. 2. 4 Buffalo大鼠肝脏细胞（BRL) 培养基（BRL-CM) DMEM (高葡萄糖，无 L-谷氨酰胺） .................................240ml ESFBS (ES 级别 FBS) ....................................... 60ml (20%) 非必需氨基酸， 100X ................................................. 3ml 2-巯基乙醇， 14. 3m〇V L ............................... 2. 2pl (0. lmmol/L ) 用 250m l的 P E S 膜过滤系统滤过

2.2.5 BRL-条件培养基
B R L 细胞在大鼠肝细胞培养基（BRL-CM) 中生长至汇合，用新鲜培养基更换一次， 3 天后收集这些培养基。

所有培养基用无菌的、孔径 0.2um 的 P E S 滤膜过滤，特别是来自其他细胞类型的条件培养基。应该注意的是：在细胞分化研究中可能被用到的生长因子和其他小分子需要无菌准备，但不能过滤，以免这些物质与滤膜结合而被损耗。

来源：丁香实验

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