材料与仪器
步骤
啮齿动物体内的病毒投递
材料
试剂
动物：大鼠或小鼠
B H K - 2 1 细胞
克他命
病毒储存液
根 据 方 案 1 制备可表达目的基因的重组 a 病 毒 ，使用前需要用〇 • 22 um 滤器过滤灭菌。
X ylazine
仪器
滤器•（无菌， 0.22um，微孔)
H am ilton 注 射 器（10/m1)
注 射 器（不锈钢）
微型输液泵
聚乙烯管
定向设备
方法
在全身麻醉并伴有体温调节控制及氧气补充的情况下进行微注射。
1 . 用方案 3 确定病毒储存液在 B H K - 2 1 细胞中的大概滴度。
2 . 稀释病毒，使之适用于实验条件。
对纹状体、扁桃体或脑皮层，使用 IO5个病毒颗粒；对脑室，使用 IO7 个病毒颗粒。
3 . 通过每千克体重腹膜内注射 2 0 0 m g 克他命和 IOmg x y la zin e 来麻醉实验动物。
4 . 根据动物调整定向设备。
5.用不锈钢注射器吸取病毒，通过聚乙烯管连接微型输液栗和 IOul H am ilton syrin g e。
6 . 以 0. 5ul/m i n 的速度融合病毒溶液。
7.将针在原位多放置 2m i n 。
8.将针缓慢的拿开。
9•缝合伤口，手术后 3〜4 h 内使动物处于温暖的环境下。
10•简单的健康检测（如体重、体温和食量等）和行为反应。
11.在注射后的不同时间点，收集组织和鉴定转基因的表达
来源：丁香实验
