材料与仪器
通过电泳分离的凝胶内蛋白质
固定液 咪唑 硫酸锌
摇床
固定液 咪唑 硫酸锌
摇床
步骤
方法 1: 直接用咪唑、SDS 和锌负染色
1.将胶浸放在固定液中 20 min,并轻轻摇动。
2.弃掉固定液,用去离子水洗胶 2 次,轻轻摇动 15 min。
3.将胶与含有0.1%SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵育 15 min,并轻轻摇动。
4.去掉咪唑-SDS 液,胶中加入0.2mol/L 硫酸锌,搅动 30~60s。
5.当胶的染色达到满意效果时,倒去硫酸锌溶液,将胶浸没于去离子水中。
方法 2: 用咪唑、SDS 与锌对考马斯亮蓝染色的凝胶进行双染色
1.在考马斯亮蓝染色结束后(见方案 9),用去离子水洗涤脱色的凝胶 2 次,轻轻摇动 15 min。
2.将凝胶与含有0.1% SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵育 15 mm, 并轻轻摇动。
3.去掉咪唑-SDS 液,胶中加入0.2mol/L 硫酸锌,搅动 30~60s。
4.当凝胶染色较好时,去掉硫酸锌溶液,把凝胶浸泡在去离子水中。
来源:丁香实验