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方案10 胶内蛋白质的锌/咪唑负染色实验

相关实验:电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

最新修订时间:

材料与仪器

通过电泳分离的凝胶内蛋白质
固定液 咪唑 硫酸锌
摇床

步骤

方法 1: 直接用咪唑、SDS 和锌负染色

1.将胶浸放在固定液中 20 min,并轻轻摇动。

2.弃掉固定液,用去离子水洗胶 2 次,轻轻摇动 15 min。

3.将胶与含有0.1%SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵育 15 min,并轻轻摇动。

4.去掉咪唑-SDS 液,胶中加入0.2mol/L 硫酸锌,搅动 30~60s。

5.当胶的染色达到满意效果时,倒去硫酸锌溶液,将胶浸没于去离子水中。

方法 2: 用咪唑、SDS 与锌对考马斯亮蓝染色的凝胶进行双染色

1.在考马斯亮蓝染色结束后(见方案 9),用去离子水洗涤脱色的凝胶 2 次,轻轻摇动 15 min。

2.将凝胶与含有0.1% SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵育 15 mm, 并轻轻摇动。

3.去掉咪唑-SDS 液,胶中加入0.2mol/L 硫酸锌,搅动 30~60s。

4.当凝胶染色较好时,去掉硫酸锌溶液,把凝胶浸泡在去离子水中。

来源:丁香实验

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