原理
机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。
材料与仪器
组织
生理盐水
研磨器 尼龙网
生理盐水
研磨器 尼龙网
步骤
1. 先将组织剪成 1~2 mm3 大小组织块。
2. 放入组织研磨器中加入 1~2 ml 生理盐水。
3. 转动研棒,研至匀浆。
4. 加入 10 ml 生理盐水,冲洗研磨器。
5. 收集细胞悬液,并经 300 目尼龙网过滤,离心沉淀 500~800 r/min,1~2 min,再以生理盐水洗 3 遍,离心沉淀。
6. 固定或低温保存细胞悬液,备用。
2. 放入组织研磨器中加入 1~2 ml 生理盐水。
3. 转动研棒,研至匀浆。
4. 加入 10 ml 生理盐水,冲洗研磨器。
5. 收集细胞悬液,并经 300 目尼龙网过滤,离心沉淀 500~800 r/min,1~2 min,再以生理盐水洗 3 遍,离心沉淀。
6. 固定或低温保存细胞悬液,备用。
来源:丁香实验