原理
机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。
材料与仪器
组织 酶
生理盐水
剪刀 尼龙网
生理盐水
剪刀 尼龙网
步骤
1. 将组织块放入平皿中,加入少量生理盐水。
2. 用剪刀将组织剪至匀浆状。
3. 加入 10 ml 生理盐水。
4. 用吸管吸取组织匀浆,先以 100 目尼龙网过滤到试管中。
5. 离心沉淀 1000 r/min,4~5 min,再用生理盐水洗 3 遍,每次以低速(500~800 min)短时离心沉淀去除细胞碎片。
6. 以 300 目尼龙网滤去细胞团块。
7. 细胞用固定液固定或低温保存备用。
2. 用剪刀将组织剪至匀浆状。
3. 加入 10 ml 生理盐水。
4. 用吸管吸取组织匀浆,先以 100 目尼龙网过滤到试管中。
5. 离心沉淀 1000 r/min,4~5 min,再用生理盐水洗 3 遍,每次以低速(500~800 min)短时离心沉淀去除细胞碎片。
6. 以 300 目尼龙网滤去细胞团块。
7. 细胞用固定液固定或低温保存备用。
来源:丁香实验