流式细胞计量术（DNA含量）实验

1. 分离细胞并移至 15 ml 的锥形管中。检查有单个细胞悬浮，1000 g 离心 5 分钟，弃上清。 2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 将细胞洗 2 次，计数细胞总数，记在管山。 3. 用约 500 μl 的 PBS 重悬细胞。 4. 加 5 ml 冷乙醇，4℃ 固定过夜。 5. 取 5X106 细胞放入 15 ml 锥形管中，1000 g 离心，弃乙醇。 6. 悬搅沉淀，用

一、组织培养细胞的染色 1. 通过对悬浮培养中的细胞倾析或对单层培养的细胞蛋白酶消化来收获细胞。计数细胞，800 g 慢速离心 3 分钟沉淀细胞。 2. 细胞染色。 3. 在 NST-DAPI 缓冲液中于冰上孵育细胞 15 分钟。 4. 用 35 μm 孔径的尼龙筛目过滤细胞。 5. 用流式细胞计量术分析染色细胞。 二、固体组织的染色 1. 如冷冻，将组织片放入装有补充 5% 小牛血