上皮细胞类培养实验

皮肤是皮表细胞培养来源，小儿包皮是皮肤表皮细胞培养的好材料。全皮培养时，表皮细胞与成纤维细胞混合生长，难以纯化。黑木登志夫（1981）用皮肤表皮和真皮分离培养法可获纯上皮细胞，有一定参考价值，其法如下： 1. 取材 取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成 0.5~1 平方厘米小块； 2. EDTA处理 先置入0.02 %EDTA 中室

一、取材 培养正常乳腺可从乳腺切除组织或乳腺成形术组织取材。预先把无菌容器送交手术室（最好含有培养液），委托术者选脂肪少、腺组织多的部位，切取少许，送培养室立即进行培养。获取组织后，应先剥除脂肪组织；培养正常乳腺组织宜用胶原酶消化法。培养乳腺癌组织可采用两种方法。 二、培养程序 1. 直接培养法 适于培养含纤维少的软组织，其主要过程是 （1）在含有少量培养液或Ha

一、培养条件的准备 1. 基础培养基 DME/F12（Sigma 产），加庆大霉素100 U/ml，pH7.4 2. 完全培养基 （1）在基础培养基中再附加相关促细胞生长因子和其它成分 胰岛素（Sigma 产） 5 μg/ml 转铁蛋白（Sigma 产） 10 μg/ml 新生牛脑提取物 10 μg/ml （2）新生牛脑提取物制法 ①取新生牛脑垂体1

一、初代组织块培养 肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏，先剥除被膜和血管等纤维成分，用刀或剪刀把肝剪成1 mm3左右的小块，采用贴壁培养法。肝组织易于贴壁，生长力好，一般次日即可出现生长晕。 二、初代消化法培养 1. 把肝组织切成2~4 立方毫米的小块，用不含钙镁的BSS液洗两次。 2. 移入1：1 的0.1 %胰蛋白酶和0.1 %胶原酶（都用无钙镁BSS配制）中

1. 取产后的新鲜脐带；如不立即培养可保存于4 ℃中，但不宜超过12 小时；无菌剪取长10~15 厘米一段。其它如胚胎和幼体动物的大血管，亦可用于培养； 2. 先用三通注射器吸温PBS液注入脐带的脐静脉中，洗除残血；注入口处宜用线绳结扎，以防液体返流； 3. 用血管钳夹紧脐带一端，从另端向脐静脉中徐徐注入最终浓度为0.1 %的胶原酶，待末端出现液体后结扎之，令充满血管，注入口应应结

一、材料 1. 肿瘤条件培养基制备 （1）取C3H小鼠的S-180 实体肉瘤组织； （2）胰蛋白酶消化，Dulbecco改良Eagle氏培养液15 ml（含10 %小牛血清），接种到T-75 Falcon产培养瓶中培养； （3）在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基；再用含10 %小牛血清的新培养液后，也每隔两天收集一次，可获多量条件培养基； （4