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简介
来源:丁香实验
操作方法
皮肤是皮表细胞培养来源,小儿包皮是皮肤表皮细胞培养的好材料。全皮培养时,表皮细胞与成纤维细胞混合生长,难以纯化。黑木登志夫(1981)用皮肤表皮和真皮分离培养法可获纯上皮细胞,有一定参考价值,其法如下: 1. 取材 取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成 0.5~1 平方厘米小块; 2. EDTA处理 先置入0.02 %EDTA 中室
乳腺组织培养实验一、取材 培养正常乳腺可从乳腺切除组织或乳腺成形术组织取材。预先把无菌容器送交手术室(最好含有培养液),委托术者选脂肪少、腺组织多的部位,切取少许,送培养室立即进行培养。获取组织后,应先剥除脂肪组织;培养正常乳腺组织宜用胶原酶消化法。培养乳腺癌组织可采用两种方法。 二、培养程序 1. 直接培养法 适于培养含纤维少的软组织,其主要过程是 (1)在含有少量培养液或Ha
胃上皮细胞培养实验一、培养条件的准备 1. 基础培养基 DME/F12(Sigma 产),加庆大霉素100 U/ml,pH7.4 2. 完全培养基 (1)在基础培养基中再附加相关促细胞生长因子和其它成分 胰岛素(Sigma 产) 5 μg/ml 转铁蛋白(Sigma 产) 10 μg/ml 新生牛脑提取物 10 μg/ml (2)新生牛脑提取物制法 ①取新生牛脑垂体1
肝细胞培养实验一、初代组织块培养 肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏,先剥除被膜和血管等纤维成分,用刀或剪刀把肝剪成1 mm3左右的小块,采用贴壁培养法。肝组织易于贴壁,生长力好,一般次日即可出现生长晕。 二、初代消化法培养 1. 把肝组织切成2~4 立方毫米的小块,用不含钙镁的BSS液洗两次。 2. 移入1:1 的0.1 %胰蛋白酶和0.1 %胶原酶(都用无钙镁BSS配制)中
内皮细胞培养实验1. 取产后的新鲜脐带;如不立即培养可保存于4 ℃中,但不宜超过12 小时;无菌剪取长10~15 厘米一段。其它如胚胎和幼体动物的大血管,亦可用于培养; 2. 先用三通注射器吸温PBS液注入脐带的脐静脉中,洗除残血;注入口处宜用线绳结扎,以防液体返流; 3. 用血管钳夹紧脐带一端,从另端向脐静脉中徐徐注入最终浓度为0.1 %的胶原酶,待末端出现液体后结扎之,令充满血管,注入口应应结
毛细血管内皮细胞培养实验一、材料 1. 肿瘤条件培养基制备 (1)取C3H小鼠的S-180 实体肉瘤组织; (2)胰蛋白酶消化,Dulbecco改良Eagle氏培养液15 ml(含10 %小牛血清),接种到T-75 Falcon产培养瓶中培养; (3)在细胞生长接近完全汇合时,收集培养液制成条件培养基;再用含10 %小牛血清的新培养液后,也每隔两天收集一次,可获多量条件培养基; (4
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