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正常细胞常规核型的标本制备实验

实验分类:

细胞实验

最新修订时间:

简介

正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。

来源:丁香实验

操作方法

微量全血培养

1. 打开超净台紫外灯20~30分钟。 2. 洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台,点燃煤气灯。 3. 用75%酒精棉球擦洗手、各种试剂瓶及操作台面,然后将培养液及肝素、秋水仙素、PHA等所需溶液移入超净台。 4. 在超净台内将每个培养瓶装入5 ml 培养液及0.2 ml PHA溶液,封好备用。 5. 用5 ml 注射器,7号针头,先吸取少许肝素湿润针筒,然后

人淋巴细胞染色体标本制备

1. 微量全血细胞培养至68小时左右,用1 ml 注射器号针头向每个5 ml 培养瓶内加2滴秋水仙素溶液。 2. 摇匀后继续培养3小时,此项操作不需要严格无菌。 3. 按时终止培养,用吸管温和吹打成细胞悬液后,移至10 ml 离心管中。 4. 用天平平衡后以1000 rpm 离心8分钟,弃大部上清,剩0.5 ml。 5. 再吹打成细胞悬液,加入预热37℃的 0.075

肿瘤细胞的染色体标本制备

1. 以1.6x 105个/ml 细胞浓度将FL-60细胞接种于培养瓶内。 2. 48小时后以终浓度为0.04ug/ml 的秋水仙素处理2.5小时,移入10 ml 离心管。 3. 其余步骤与淋巴细胞染色体制备相同。 4. 将长成单层的HeLa细胞按1:2传代进行培养,36小时后用终浓度为0.04 ug/ml 的秋水仙素处理3小时。 5. 按时终止培养,用0.25%胰蛋白酶-0.02%ED

人体染色体常规核型的分析

一、人体染色体的观察 1. 取制备较好的染色体玻片标本,先在低倍镜下观察。 2. 在标本中选择一个染色体之间分散较好,互不重叠的中期分裂相,置于视野中央,然后换油镜仔细观察。 3. 每个染色体都含有两条染色单体,两单体连接处为着丝粒。 4. 计数时要把分散的染色体划分为几个区域以免计数重复或遗漏,然后计数并判定性别。 二、核型分析的方法 1. 人体染色

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