牛乳中细菌的检查实验
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简介
从健康母牛体内刚挤出的牛奶，含有少量的正常起始微生物。但将牛奶装入未消毒的器具和在分装、运输过程中，会被很多其他微生物甚至致病菌污染，而且牛乳含有丰富的营养物质（糖类、蛋白质、脂肪、无机盐和维生素等）， 在其中的微生物会很快繁殖，因此，一份牛乳样品的细菌含量可反映母牛的健康状况和牛乳生产与保藏的条件。
牛乳的细菌学检査方法有下列三种：1. 显微镜直接计数法——涂片面积与视野面积之比估算法；2. 美蓝还原酶试验法；3. 标准平板计数法。
来源：《微生物学实验（第三版）》
来源：丁香实验
操作方法
1. 在白纸上画出 1 cm2 的方块，然后将玻片放在纸上。2. 用 10 ul 的微量吸液器吸取混匀了的生牛乳样品，放在玻片 1 cm2 区域的中央。3. 用接种针将牛乳涂匀，并涂满 1 cm2 的范围。4. 使涂片于空气中慢慢干燥。将铁丝试管架放在沸水浴中，然后置已干燥的涂片于试管架上，用蒸汽热固定 5 min，待干。5. 浸于美蓝染液缶内染色 2 min。6. 取出玻片，用吸水纸吸去多余的染
美蓝还原试验法1. 标记 2 个无菌试管 1 和 2。2. 分别向 2 个试管加入 10 ml 生鲜牛乳样品和质差牛乳样品。3. 分别向两管各加入 1 ml 美蓝溶液，盖紧管塞。4. 轻轻倒转试管约 4 次，置 37℃ 水浴中，并记录培养时间。5. 测试管在水浴中稳定 5 min 后，取出，轻轻倒转一次后再放回水浴中。6. 每隔 30 min 现察记录试管中美蓝颜色的变化，直至 3～6 h。
巴斯德（巴氏）法消毒牛乳1. 将水浴锅的温度调节到 80℃。2. 将生牛乳样品用力摇匀，使微生物能均匀分布。3. 用灭菌的 10 ml 吸管吸取 5 ml 生牛乳样品放入灭菌试管内，然后将试管放入调好温度的水浴锅中（水面要超过牛乳的表面）。4. 保持 15 min，并不时摇动。5. 一到 15 min，立刻取出试管，用流动的自来水冲试管外壁，使其中的牛乳迅速冷却。
标准平板计数法1. 将巴斯德消毒牛乳样品充分摇匀，并进行稀释，使稀释度为 10-2 、10-3 和 10-4。2. 用 1 ml 灭菌吸管从最大稀释度开始各取 1 ml 注入已标明样品和稀释度的空白培养皿内。3. 各平板倾注约 15 ml 已溶化并冷却至 45℃ 左右的肉膏蛋白胨琼脂，立即放桌上摇匀。4. 凝固后倒量于 37℃ 下，培养 24 h。5. 选择长有 30～300 个菌落的平板计数，并算 1 ml
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