材料与仪器
生牛乳 10 ml
10 ul 微量吸液器与吸嘴 载玻片 美蓝染液（Levowitz－Weber 染料）缶 显微镜 水浴锅 试管架 吸水纸
步骤
1. 在白纸上画出 1 cm2 的方块，然后将玻片放在纸上。
2. 用 10 ul 的微量吸液器吸取混匀了的生牛乳样品，放在玻片 1 cm2 区域的中央。
3. 用接种针将牛乳涂匀，并涂满 1 cm2 的范围。
4. 使涂片于空气中慢慢干燥。将铁丝试管架放在沸水浴中，然后置已干燥的涂片于试管架上，用蒸汽热固定 5 min，待干。
5. 浸于美蓝染液缶内染色 2 min。
6. 取出玻片，用吸水纸吸去多余的染料，晾干。
7. 再用水缓缓冲洗，晾干。
8. 油镜下观察细菌数，共数 30～50 个视野。
9. 计算
每毫升的细菌总数＝平均每视野的细菌数×500 000
因为：
一般油镜的视野直径为 0.16 mm
一个视野的面积＝0.082 × 3.1416＝0.02 mm2 ，化成 cm2 ，视野面积＝0.02 × 0.01＝0.0002 cm2 ，1 cm2 的视野数＝1.0 ÷ 0.0002＝5000
又因每 1 cm2 的牛乳量为 0.01 ml，即 1/100 ml，
则每一视野的牛乳量＝1/100×1/5 000＝1/500 000 ml
所以，一个视野中的 1 个细菌就代表 1 ml 牛乳中有 500 000 个细菌。因此 1 ml 牛乳中的细菌数＝一个视野的细菌数×500 000＝ 50 个视野的细菌数 ÷ 50×500 000
来源：丁香实验
